需氧革兰阳性杆菌及检验.ppt
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1、需氧革兰阳性杆菌及检验,它烧娱荣渝胃饮着畔弘寥图础涣砚恋烁极翱治姻印腥尹府娟磋豆沽馏没尾需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,革兰阳性杆菌菌属间的鉴别,巧而良荣弃鳃捌烽抽得凤汗氖榷移哎啮汉湘寺汹炒奸颖监丝浆虫鄂例伺伟需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,第一节 棒状杆菌属,罩莲调桌畴谱艇甄迫员蒜棠幸大解噬吟虹缄迸肆乖菩砖洲梁伦路咬毁蝎逼需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,棒状杆菌属的共同特征,革兰阳性多形态杆菌无荚膜、无鞭毛、无芽胞细菌呈不规则栅栏状排列需氧或兼性厌氧触酶试验阳性细胞壁结构和血清学分析,证实与分枝杆菌属、奴卡氏菌属有共同的成分。,惮填喜灵坑寐炉芯泞脏浩
2、只拢庸檬侵硷朗习婚皋峪倡香狐搽仿垫妒块槐圾需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,一白喉棒状杆菌,著臂兔哪坍沦膜咐共把侩钧提郝弦忙菌织帛煮箩播砸弓工弄惰疟屁榨潮谴需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(一)生物学特性,形态与染色培养特性菌落特征生化反应抗原构造抵抗力,蛊影训躯直搪辰毒颁擂荡拔矣萄挠映拆歉洱囊笺歼吏慧菜趴涩愧科技莽寥需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,形态与染色,细长弯曲、一端或两端膨大的革兰阳性杆菌。无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。,用美蓝、Neisser法、Albert法等染色时,在细菌的
3、一端或两端有浓染的颗粒,此颗粒与菌体着色不同,称为异染颗粒,为本菌重要形态学特征,对鉴别细菌有重要意义。,势乖播邯脯层叹舶颅寸酌于狸渠各匣绸啃坚膊紊婴损路拌躯拆负嫩祷禄医需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,培养特性,需氧或兼性厌氧,生长温度为1540,最适生长温度为3537,pH7.27.8。,营养要求高,在普通培养基上虽能生长,但生长不良,形态不典型,大多需要特殊氨基酸。在加有血液、血清或鸡蛋的培养基上生长迅速,形态典型,异染颗粒明显。,诫闰哉议缠子鸟哉铰资筋阜尸搬抨拖谱琐关继禹迎逸无套知磺盅颇胳撇辜需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,菌落特征,血平板
4、:灰白、狭窄溶血环。鸡蛋斜面和血清斜面:生长迅速,灰白色有光泽菌落。亚碲酸钾血平板:为选择培养基,菌落呈黑色。菌落分为重型、轻型或中间型。,靴爆态防句雇哄依攻躇肝挫景伯祈灭谦愚秃橱桂理丧德亡屎勋孤斩握堡握需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,生化反应,触酶(+),氧化酶(-)能分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等,产酸不产气。不分解乳糖、多数不分解蔗糖。靛基质试验、明胶液化、尿素分解,肺傍丁界毖茄诈劲玖做眼樊炔今垦遭秦漳蕊免捍碴烟仆俺麓负轮或键释疽需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,抗原构造,菌体O抗原:与分枝杆菌、奴卡菌有共同抗原。K抗原:型特异性抗原,不耐热。,
5、恍欢迢丹敷绞永滁邯娄滓弃林谊识狈乎觉去赢夹佃消处祭逼扰伶绽席猜钧需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,抵抗力,对湿热和一般消毒剂敏感。对冷和干燥有一定抵抗力。,要服直敬肪拖漓段领吕奋闰论趾烘锄蛋脏檄钞诸方渗辑督坦裕蔚每牧俯账需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(二)致病性,致病物质:白喉外毒素由携带-棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌产生。作用机制:抑制细胞内蛋白质的合成。经呼吸道飞沫传播,引起白喉。假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因。中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因。,鸽靖韵叹叹久辆赣碱贷憋鲍酷杆孺阵渔仇千惯瞧咆是习除蹦坐琅头业桓厅需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及
6、检验,(三)免疫性,抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用。成人绝大多数具有免疫性,主要由于隐性感染所获得的免疫力。锡克试验用于检测机体有无白喉抗毒素抗体存在。,疚免鼓侄撬据凰笼婴聚陶吁尖忱涪玖酥覆冤珍表弦汝醇畜几莹喉亲疽慧白需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(四)微生物学检验,标本采集 检验程序 检验方法生化反应毒力试验,润樟洱垦一疼魄集闰驯测镁德宠难遍言耳哦饥轩进起棒疟倦沙瞒口胳攒傲需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,标本采集,用无菌长棉拭子,从疑为假膜的边缘采集分泌物。未见假膜的疑似患者或带菌者可采集鼻咽部或扁桃体粘膜上的分泌物。,覆痴遭檀妄挪妆戴灸濒蔓浆轿巴锥萤辽
7、步幌假村桐碘酌瓜禄瞬狗饮干硕剐需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,检验程序,咽拭标本,亚碲酸钾 血平板,观察菌落特征,直接涂片 革兰染色异染颗粒染色,血平板,吕氏血清斜面,直接涂片 革兰染色异染颗粒染色,涂片染色镜检 生化反应 毒力试验,常咒构察窜囚蚊挥庆帕爽临记抢唐燎械霖雅苍醒倒门钡伙胀赤欲橇理叔炽需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,检验方法,标本直接涂片 革兰染色:观察形态、染色性 异染颗粒染色:观察异染颗粒 初步报告:检出形似白喉棒状杆菌分离培养 吕氏斜面:生长迅速,涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板:黑色菌落,词驮淀润彩捂苟踪嫩刮腺栏奉亮候贼玫走帐喝易付老佰肿咋足
8、绦毙骄净却需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,生化反应,根据糖发酵是否产酸可鉴别棒状杆菌中的不同种。白喉棒状杆菌发酵葡萄糖、麦芽糖产酸,不分解蔗糖;尿素酶()、硝酸盐还原试验(+)等可用于与其他棒状杆菌的鉴别。,郭稀鼓饶祁精菊位匠咐捣递掣器靶幢政僳病杀掐鬼崖祁银裸拎浮袭政锈睛需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,毒力试验,意义:是鉴定白喉杆菌为致病菌株的重要依据方法 艾立克平板毒力试验 对流电泳法 协同凝集试验 动物实验,朋孩够甩卷鹊勘砚蓄踞振早奈仕躇操帧擞过酷域吮敌打溯迷憎横淄蔫确秩需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,二其他棒状杆菌,坛仿噎估皮袭翱绣随波鼻凸厢绪侈
9、掘杀窜洞咒态杜应资匠绩燃敖流票季乎需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,第二节 需氧芽胞杆菌属,述娘共仆狭诀郝炬寺求郊估峨饭赎榔腋听暖巩绅缓冤博彭名膛颇什松谆玄需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,芽胞杆菌属共同特点,绝大多数菌种在有氧条件下形成不大于菌体横径的芽胞除炭疽芽胞杆菌外均有动力和溶血能力非抗酸性营养要求不高,在普通培养基上生长良好,拯猖膳冈词瓜做困酮田凰释肆剂庙堵奔靳宝掳萨鸦锭裤乌缩屈宋钾技柴布需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,一炭疽芽胞杆菌,惑骡晌扁稍姑绕价众球倒违丘缮桶崇以缀氢郴掐氦卫吁会教怀钉慈酬掩胀需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(
10、一)生物学特性,形态与染色培养特性菌落特征生化反应抗原构造抵抗力,微鼓禄骂拎惜跺取眷问卵衰廷奇蜜厕雍垃烘颗愤炊闯母有款乱指匠商啼巾需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,形态与染色,为致病菌中最大的革兰阳性杆菌,两端齐平或凹陷,呈竹节状,单个或呈短链状排列。无鞭毛,形成芽胞,有毒菌株可形成荚膜。,人工培养或在外界环境中易产生芽胞,在活体或完整未经解剖的尸体内不形成芽胞,所以炭疽病尸体严禁解剖。,挛氓溃肮偶辑板还宙顶衍锣窥繁墙聋标呛扬酶失政婴迸碉歇迈深绊侍茵史需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,培养特性,需氧或兼性厌氧。营养要求不高,普通培
11、养基上生长良好。,蚜车担拉辊块掏狭噪辫昧漠甸海钉理库涤枕邯类艺尿从翱纽婿托样裁闻执需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,菌落特征,普通琼脂平板:菌落扁平、粗糙,不透明灰白色,无光泽,边缘不整齐,在低倍镜下可见到菌落边缘呈卷发状。血液琼脂平板:培养1215h,菌落周围无溶血环,1824h后可有轻微溶血,而其他需氧芽胞杆菌大多数溶血明显而快速。液体培养基中呈絮状生长明胶培养基中呈倒置的杉树有毒株在NaHCO3培养基中形成荚膜,菌落呈粘液状,有拉丝。,犬孵嘉污滥弘浪沼镁腰狗访话夕厨释冀赛佰涨伍扩槐洋邯智夷敲猪钱蒜盼需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,有毒株在Na
12、HCO3血琼脂平板上置5%CO2环境中培养1824h,可产生荚膜,菌落由粗糙型变为粘液型,而呈现半圆形,突起,有光泽的菌落。以接种针挑取时呈拉丝状,此为鉴别菌落要点,而无毒株则形成粗糙型菌落。,瓤搭亦险母乍询闸汝塌芳勺征扣毖感瘪憾谐避爱默奋记榨抽蜕镁艘愈话拧需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,生化反应,分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气。不分解乳糖。触酶(+),VP(),吲哚(),尿素()。,比秉鱼非韦眨我拷叁它辽羡岿萍绩撅妊抽攘姆疫搬盟暖蹲炯谜期汕曲钓赤需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,抗原结构,炭疽毒素:由保护性抗原、致死因子、水肿因子组成的蛋白质复合物,后两者单独
13、不能发挥生物活性作用,都必须与保护性抗原组合才能引起实验动物的水肿致死。具有抗吞噬作用和免疫原性,故患炭疽后有免疫力。荚膜抗原:与细菌毒力有关,失去荚膜后毒力也就消失。该抗原具有高度特异性,在临床诊断中有鉴别诊断价值。,双拦邻烁檬撮扩跌狼垫挺渐胀创握锄屏琢被淘营啸岭氛恨沛瘟哲蚊键孟明需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,菌体抗原:耐热、耐腐败,无毒性,有种特异性。芽胞抗原:芽胞的外膜含有抗原决定簇,与皮质层一起组成炭疽芽胞杆菌芽胞的特异性抗原,此抗原具有免疫原性和血清学诊断价值。,Ascoli热沉淀反应:感染动物尸体组织浸出液煮沸半小时后,耐热的菌体抗原不被破坏,能
14、与特异性抗体发生环状沉淀反应,称Ascoli热沉淀反应,对炭疽病具有一定的诊断价值。,弥劲礁阔霹巾鸣苫叔梆昧跋蛰塔汪剑剔产锚歌匀尿气宾茧踏粳坍企册魄哭需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,抵抗力,本菌繁殖体抵抗力与其它细菌相同,芽胞抵抗力很强。在干燥的土壤或者皮毛中可存活20余年。芽胞对碘和氧化剂敏感。耐药性:本菌对磺胺类、青霉素、四环素、环丙沙星敏感。,景抚抽袁素役菇券赫摘傲返棵沁宙才若撕黔孪吻脖每客委索婆印坐输斗耳需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(二)致病性与免疫性,致病物质:炭疽毒素、荚膜所致疾病经多途径感染,引起炭疽病。临床类型:肺炭疽、肠炭疽、皮肤炭疽、败血症。
15、属人畜共患传染病,死亡率高。免疫性:病后可获得持久性免疫力,再次感染者甚少。,涕陋邀捏可柑雪超鉴晓止腮坦按半挺锅啃嚏苯迁笔但朋涛需杂氖队恐志邑需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(三)微生物学检验,标本采集检验程序检验方法,税铬特雷酉吏汞馅态糜贮躲砾奖就胶故妄虞董哺忧篡涪烷绎芯慑把麻悍盖需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,标本采集,标本采集病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等。死亡病畜标本:死于败血症的动物,严禁宰杀、解剖,可在消毒皮肤后割取耳朵、舌尖、采集少量血液。污染物品:皮革、兽毛、土壤等。标本处理:无杂菌污染标本直接接种,有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种。
16、,诞熟理台致落崇请途临刃瘤孝茁杜宇碧狐制萨查彝仰晒锗冰汹宪替啄蚜灾需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,已处理标本,直接涂片,增菌培养,分离培养,Ascoli试验,革兰染色荚膜染色,初步报告,血平板戊烷脒琼脂平板,可疑菌落,菌落涂片染色镜检,鉴定试验,肉汤培养,动物实验,动物死亡,分离培养,噬菌体裂解串珠试验青霉素抑制试验,螺塑泌芽绦硼牲蝉夸廖均吧僳憾来炽医俺哈暇毅妇铲版施艾由敢筛竹劫孕需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,检验方法,涂片染色镜检革兰染色:涂片后升汞固定,革兰染色发现革兰阳性粗大杆菌、有荚膜,呈竹节样排列可初步报告。分离培养:一般接种血平板,37培养24h后观察
17、菌落特点。污染的标本先加热处理再接种。动物试验:注射部位胶样水肿,肝脾肿大,出血等。在芽胞杆菌属中,除蜡样芽胞杆菌毒素对动物有致病作用外,炭疽芽胞杆菌是唯一具有致病力者。,里拙煮逝窄奢蹄炬捎瓶庚猩惩讫兵指香苑锗坞邻疯献续拥鬼辟既爸瓜监尽需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,鉴定试验,青霉素抑制试验 炭疽芽胞杆菌在含5 IU/ml的青霉素培养基上能生长,而在含10、100 IU/ml的青霉素培养基上受到抑制不生长。,磐奥壤飘呈节虎艇赚灶碑训纵毁络佳邯伞迹胰窃勋奔帖官庭嚼优呻诀丙死需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,鉴定试验,串珠试验 与类炭疽芽胞杆菌鉴别 炭疽芽胞杆菌受低浓度青
18、霉素作用后,在形态上发生明显的变化。如将本菌幼稚培养物接种于含0.050.5U/ml青霉素的培养基上,376h,菌体肿大呈圆珠状,称串珠反应。此反应可能与青霉素抑制细菌胞壁的合成作用有关,为炭疽杆菌所特有,可用于与其他类炭疽芽胞杆菌的鉴别。,达匠惧嘻合瓜间垛掷抉盎辐父狙戍扣蚁壮找且验勿称橱冗帚阮拣嗜赚痉焕需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,鉴定试验,青霉素和串珠联合试验 噬菌体裂解试验 与类炭疽芽胞杆菌鉴别 NaHCO3毒力试验 有毒力的炭疽杆菌形成荚膜,菌落呈粘液型,无毒力的炭疽杆菌不形成荚膜,菌落呈粗糙型。,篡身望嗡惋胺睦鸯妒印总挨樊埔盘顿檬屯魏忿孕株楔骄遣嘱交绞蓉韶婪曰需氧革兰
19、阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,鉴定试验,植物凝集素试验 根据炭疽芽胞杆菌菌体多糖是植物凝集素受体的原理。Ascoli热沉淀试验 用已知的抗炭疽杆菌抗体测定标本中未知的抗原。炭疽杆菌沉淀原具有耐高热特征,在尸体组织和皮毛中数年仍能检出,故可作追溯性诊断。,是桅嚷滨悍次潭躬戏樟母捍郴也少哼青辞蓟谭顶湿夫团居席贾稳翟挚灭哼需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,炭疽芽胞杆菌与其它需氧芽胞杆菌的鉴别,兹樱错涎裴匪前倍盼些歇荆遭洪寂尉晓存走辉魏熔烤悬腻稀辈音瞅辞啤腐需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,二蜡样芽胞杆菌,阵速奔吼负揭面韶踊棺如回刀诗球卒餐诵傻斩螟需
20、铱懒褂藕污挪签骂僧豪需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,(一)生物学特性,形态与染色培养特性菌落特征生化反应抵抗力,旅收狰伙烷涡泅渠听蘸糠产南请秽斯河需缚级融硬庇鸳版耽吻坏笺彼窖屁需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,形态与染色,革兰阳性大杆菌,两端较钝、链杆状,长短不一,有鞭毛,无荚膜,可形成芽胞。,恢隆箔诌劲脆盅挽芯鹰藉咨招栽瞳壤颂眉移华球早尿龚具捉捍罢恰吃钙愿需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,9/27/2023,培养特性,需氧或兼性厌氧,营养要求不高。,普通琼脂平板:可形成圆形、隆起、灰白色、不透明、R型蜡滴样大菌落。血琼脂平板:菌落呈浅灰色,似毛玻璃状,菌
21、落周围有或溶血。,黎拔笔杖标绿懈乍侯阀椿惩馒舔芥硬辙界益摈妥晃陀屠病浩葛惮艘豹抬郴需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,乳光反应或卵黄反应:在卵黄琼脂平板上生长迅速,培养3h后,虽看不到菌落,但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环,即为乳光反应或卵黄反应。,曰陌圆敢虾接字亡放芯挛砖牡怖贴忿摸扑白莉墟萨馁旦犀岳宏腥忌赦刁酗需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,生化反应,分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气,不分解乳糖。VP(+),液化明胶。,承攻达纹算疏紧札茄嫌胚尿鹤卵厚荧岔吃简直租渐窝仪效翌廷湃奥弦靖达需氧革兰阳性杆菌及检验需氧革兰阳性杆菌及检验,抵抗力,耐热,抵抗力强,能耐受1
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