细胞的基本功能.ppt

《细胞的基本功能.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细胞的基本功能.ppt（83页珍藏版）》请在课桌文档上搜索。

1、第二章 细胞的基本功能,本章重点：,细胞膜的基本化学组成和结构(复习）；物质跨膜转运的形式和原理；细胞的跨膜信号转导功能；细胞的生物电和有关现象；肌细胞的收缩活动。,第一节细胞膜的基本结构和物质转运功能,一、细胞膜的结构概要组 成：脂质，蛋白质，糖类 基本结构：流体镶嵌模型（fluid mosaic model),（一）脂质双分子层组成：70磷脂，30 胆固醇存在形式：双分子层特点：具有流动性功能：1.屏障作用 2.传递信息,脂质双分子层,1.磷脂 动物细胞膜中主要的 四种磷脂：磷脂酰胆碱(膜外侧)、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸。2.鞘脂类 基本结构和磷脂类似，不含甘油(膜外侧)。3

2、.胆固醇 有一个甾体结构（环戊烷多氢菲）和一个8碳支链。,(二)细胞膜蛋白质,功能：酶蛋白 转运蛋白 受体蛋白 转运物质 传递信息 免疫标志 结构：主要以-螺旋或球形蛋白质的形式存在。表面蛋白 存在形式 整合蛋白 特点：流动性（横向移动）,表面蛋白（Peripheral proteins）占20%30%,以静电引力或离子键与整 合蛋白结合,附着于膜表面，主要在内表面。,arg,p.ser.,-,+,+,+,+,-,-,-,（三）细胞膜糖类,细胞膜所含糖类2%10%，成分：主要是一些寡糖和多糖链形式：共价键的形式和膜脂质或蛋白质结 合，形成糖脂或糖蛋白部位：糖链绝大多数是裸露在膜的外面一侧。功能

3、：免疫标志 传递信息,（一）单纯扩散概念：高浓度区域中的溶质分子将向低浓度 区净移动，这种现象称为单纯扩散。物质的移动方向和速度：决定于各该物质的浓度差，膜对该物 质的通透性。,扩散的物质：脂溶性高、分子量小的物质。O2、CO2、N2、乙醇、尿素、水等。,1.经载体易化扩散 特征：（1）顺梯度（2）饱和现象（3）载体与溶质的结合有较高 的化学结构特异性。（4）竞争性抑制,（二）膜蛋白介导的跨膜转运：根据转运方式的不同，通道 膜蛋白分为 载体 离子泵 转运体 被动转运：通道、载体膜蛋白介导的跨膜转运（不耗能、顺梯度）原发性 主动转运：泵 继发性（耗能、逆梯度）,2经通道易化扩散 概念:带电的离子

4、如Na+、K+、Ca2+、CI-等借 助于通道蛋白的介导,由膜的顺浓度梯度 或电位梯度的跨膜扩散。特点:a.通道具有开放和关闭状态;b.对转运物质有选择性,但无载体蛋白那么严格,分类:化学门控通道：膜两则（外测）出现 化学信号时开放。,电压门控通道：膜两则电位差改变决定其开放或关门。,离子通道功能状态：静息状态-通道关闭：(备用状态)刺激能开放激活状态-通道开放：离子扩散失活状态-通道关闭:刺激不能开放,离子通道功能状态的调控：通道蛋白质有别于载体的重要特点之一，结构和功能状态可以因细胞内外各种理化因素膜电位、化学信号、机械刺激的影响而迅速改变。通道蛋白质结构中可能存在着类似闸门（gate）一

5、类的基团，由它决定通道的功能状态。-门控 电压门控通道-膜两侧电位差 化学门控通道-化学物质（Ach）机械门控通道机械刺激,3.原发性主动转运,概念:指细胞通过直接利用代谢产生的能量将物 质(离子)逆浓度梯度或电位梯度进行跨膜 转运的过程。化学本质：钠泵是Na+-K+依赖式酶的蛋白质。也称Na+-K+-酶。启动机制：启动和活动强度与膜内多Na+和膜外多K+有关。,钠泵活动时 泵出Na+和泵入K+同时进行或“耦联”在一起,细胞膜上的钠泵活动的意义：（1）由钠泵活动造成的细胞内高K+，是许多代谢 反应进行的必需条件；（2）Na+和K+浓度梯度使细胞生物电活动产生的 前提条件。（3）维持胞质渗透压和

6、细胞容积相对稳定。Na+和Cl-漏入K+漏出。哇巴因抑制钠泵活 动大量细胞外Na+、Cl-漏入膜内，胞质渗透 压升高，过多水进入膜内，引起细胞的肿 胀，进而破坏细胞的结构；,（4）维持细胞内pH相对稳定。Na+-H+交换（5）维持细胞内Ca2+浓度的稳定。Na+和K+浓度梯度是Na+-Ca2+交换动力。（6）生电性。个Na+移到膜外同时个K+移 入膜内。（7）Na+浓度梯度是其他物质继发转运的动 力。,通道转运与钠-钾泵转运模式图,4.继发性主动转运,概念：许多物质在进行逆浓度梯度或电位梯度的跨膜转运时，所需的能量并不直接来自ATP的分解，而是来自Na+在膜两侧的浓度势能差，后者是钠泵利用分解

7、ATP释放的能量建立的。这种间接利用ATP能量的主动过程称为继发性主动转运。,机制：转运体（膜蛋白）利用膜两侧Na+浓度梯度或电位梯度跨膜转运。没有Na+由高浓度的膜外顺浓度差进入膜内，就不会出现葡萄糖、氨基酸等分子逆浓度差进入膜内。,转运体：膜蛋白同向转运：被转运的物质与Na+移动的方向相同。相应的转运体称为同向转运体。反向转运：被转运的物质彼此与Na+移动的方向相反。相应的转运体称为反向转运体或交换体。,被动转运 主动转运 比较单纯扩散、易化扩 泵 异同点转运物质 脂溶性、小分 水溶性、小分子、离子 水溶性、小分子、离子动力 浓度差 浓度差、电压差 ATP 顺梯度 顺梯度 逆梯度特点 扩散

8、速度取决于 膜蛋白介导 膜蛋白介导 浓度差 通道 载体 原发性、继发性 膜通透性 浓度差 饱和 膜通透性 特异性 电压差 竞争抑制 不耗能 不耗能 耗能,主动转运与被动转运的区别,主动转运,被动转运,需由细胞提供能量,不需外部能量,逆电-化学势差,顺电-化学势差,使膜两侧浓度差更大,使膜两侧浓度差更小,第二节 细胞的跨膜信号转导一、G蛋白耦联受体介导的信号转导,主要途径：1.受体-G蛋白-AC途径:物质 膜表面的特异受体 Gs-(兴奋性G蛋白)激活腺苷酸环化酶 胞浆中的ATP分解 膜内侧胞浆中cAMP(有时是减少),实现激素对细胞内功能的调节,2.受体-G蛋白-PLC途径外界剌激信号 膜受体

9、Go的G蛋白 激活磷脂酶C磷脂酰肌醇 三磷酸肌醇(IP3)二酰甘油 第二信使 影响细胞内过程,完成跨膜信号转导。,二、离子通道受体介导的信号转导 1.离子通道受体-促离子型受体（化学门控通道）因化学门控通道具有受体功能，也称为通道型受体；激活时直接引起跨膜离子流动，也称促离子型受体。控制通道开、关的因素-化学物质。主要分布：肌细胞终板膜、神经细胞突触后膜、嗅、味感受细胞膜中,使所在膜产生终板电位、突触后电位以及感受器电位等局部电反应。,2.电压门控通道：主要分布:神经轴突、骨骼肌、心肌细胞的一般质膜 中,控制这类通道开、关的因素是通道所在 膜两侧的跨膜电位的变化。3.机械门控通道：细胞表面膜存

10、在能感受机械性刺激并引起 细胞功能改变的通道样结构。特点：速度快、对外界刺激反应的位点局限。,三、酶耦联受体介导的信号转导特点：受体分子的胞质侧自身具有酶的活性，可直接激活胞质中酶。受体只有一跨膜-螺旋和一个较短的膜内肽段。酪氨酸激酶受体 重要的受体有 鸟苷酸环化酶受体,（一）酪氨酸激酶受体特点：膜外侧-配位体结合点 深入胞质端-酪氨酸激酶结构域 受体与酶是同一蛋白分子肽类激素如胰岛素和细胞因子 相应的靶细胞时,激活细胞膜酪氨酸激酶受体 胞质侧酶活性部位活化 胞质酪氨酸激酶结合、激活 完成跨膜信号转导 一系列细胞内信号分子 细胞核内基因转录改变。,（二）鸟苷酸环化酶受体 膜外侧-螺旋分子N端-

11、配位体结合点 膜内侧-螺旋分子C端-鸟苷酸环化酶（GC）结构域,与配位体结合活化。机制 GTP CG CGMP 蛋白激酶G（PKG）PKG活化 底物磷酸化,第三节 细胞的生物电现象,一、细胞膜的被动电学特性（一）膜电容和膜电阻细胞膜的电缆学说 细胞外液和细胞内液均为含电解质的液体，可以看作为两个导体，有一定的电阻；膜电容：细胞膜脂质双层类似于一个平板电容器，相对地视作绝缘体，因此细胞膜具有显著的电容特性。,跨膜电位：当膜上的离子通道开放而引起带电离子的跨膜流动时，就相当于在电容器上充电或放电而产生的电位差，称为跨膜电位或简称为膜电位。膜电阻：通常用它的倒数膜电导G来表示。对带电离子而言，膜电导

12、就是膜对离子的通透性。,细胞膜相当于一条电缆一点给予膜一个突然的电流，从另一点记录膜电位变化：在电源附近电位上升快，达 到的最高电位也较大；离开电源越远，则不但电位 上升的慢，而且最终的最高 电位也较低。电位改变变慢，是膜电容引 起的后果；电位依距离变 小，是膜外电阻、膜电阻及 膜内电阻引起的后果。,细胞膜的被动电学特性与电学特性,相同点：欧姆定律 电阻、电容、电流、电紧张 异同点：膜离子通道-离子流 泵电流-生电性Na+-K+泵,（二）电紧张电位概念：细胞膜的电学特性相当于并联的阻容耦合电路，跨膜电流随着距原点距离的增加而逐渐衰减，膜电位也逐渐衰减，形成一个规律的膜电位分布，这种由膜的被动电

13、学特性决定其空间分布的膜电位称为电紧张电位。,产生：向神经纤维的某一点注入不同方向的电流；用正、负电极从膜外侧施加电刺激，胞质内的负电荷流向正极下方，正电荷流向负极的下方，因而在正、负电极下分别产生一个彼此方向相反的电紧张电位。,二、细胞的静息电位,安静时 静息电位 受刺激时 动作电位,（一）电生理学研究方法：1.细胞内记录：微电极,细胞内记录：微电极,2.膜片钳实验技术,是一种能够记录膜结构中单一的离子通道蛋白质分子的开放和关闭，亦即测量单通道离子电流和电导的技术。,(二)静息电位(resting potential)1.概念：是指细胞未受刺激时存在于细胞膜内外两 侧的电位差。2.测量方法：

14、细胞内电位记录方法 静息电位表现为膜内较膜外为负。,记录装置 记录仪器:电极:一对测量电极一个放在细胞的外表面，另一个连接玻璃微电极。当微电极刺入膜内时，记录仪器上显示一个突然的电位跃变，表明细胞膜内外两侧存在着电位差。存在于安静细胞的表面膜两侧的，故称为跨膜静息电位，简称静息电位。,特征：静息电位在大多数细胞是一种稳定的直流电位,但不同细胞的静息电位数值可以不同;只要细胞未受刺激、生理条件不变,这种电位将持续存在。,静息电位时膜两侧所保持的外正内负状态称为膜的极化(polarization)；膜内外电位差的数值向膜内负值加大的方向变化时，称为膜的超极化(hyperpolarization)；

15、膜内电位向负值减小的方向变化，称为去极化或除极化(depolarization)；,去极化至零电位后膜电位进一步变为正值称为反极化，膜电位高于零电位的部位称为超射（overshoot）。细胞先发生去极化，然后再向正常安静时膜内所处的负值恢复，则称作复极化(repolarization),研究方法1902年-Bernstein膜学说 安静状态下膜只对K+有通透性，静息电位相当于K+平衡电位。1936年-Young 发现直径1mm头足类软体动物枪乌贼的巨大神经轴突1939年英国生理学家Hodgkin、Huxley 将直径0.1mV充满海水的毛细玻璃管纵向插入乌贼大神经轴 突的断端。细胞外电极:置于

16、浸泡细胞的海水中.实测膜内电位约-60mV,(二)静息电位的产生机制：1.K+驱动力：K+浓度、电位势能。2.基础条件：安静状态下膜对K+有通透性，K+外流 钾外流，带负电的蛋白不能外流，使膜外带正电荷，膜内带负电荷。当促使钾外流的浓度势能差同阻碍钾外流的电势能差相等时，钾跨膜净移动量为零，相当于Ek。膜两侧的电位差也稳定于某一数值不变，这个电位差称为K+的电化学平衡。3.少量的Na+和Cl-内流 抵消一部分由K+外流引起的膜内电位。4.Na+一K+泵 外流K+和漏入的Na+可激活钠泵，生电作用。,三、动作电位及其产生机制(一)细胞的动作电位 概念：在静息电位的基础上，可兴奋组织或细胞受到一个

17、适当刺激时，其膜电位发生迅速的一过性的波动，这种短暂可逆的、扩布性电变化称为动作电位(action potential)。,特征：“全或无”性质。当刺激未达阈值时，动作电位不会出现，一旦达到阈电位水平，动作电位便迅速产生，并达到最大值，其幅度和波形不随刺激的强度增强而增大。动作电位能沿细胞膜向周围不衰减性传导，其幅度和波形始终保持不变。具有不应期，峰电位不可融合叠加。,0mV,神经纤维,AP,兴奋的共有标志:动作电位,上升支 去极化（-70 到0 mV）峰电位 超射（0到+30 mV）动作电位 下降支 复极化（+30到-70 mV）负后电位-后去极化 后电位 正后电位-后超极化（负值大于-70

18、 mV）,（二）产生机制：研究方法,间接法：1949.Hodgkin和Huxley葡萄糖溶液替代海水。同位素24 Na+定量研究计算每次动作电位进入膜内Na+21000个/m2膜电容算出Na+流量使去极化达100mV以上。直接法：电压钳,1.电化学驱动力：它决定离子跨膜流动的方向和速度。动力：电-化学梯度;基础条件：膜对离子的通透性增大，当膜电位等于某离子的平衡电位时，该离子的电化学驱动力为零，因此，某离子的电化学驱动力等于膜电位与该离子的平衡电位之差。假定静息电位Em 为-70mV，ENa为+60mV，EK为-90mV：Na+驱动力:Em-ENa=-70mV-(+60mV)=-130mV K

19、+驱动力:Em-ENa=-70mV-(-90mV)=+20mV,2.动作电位期间膜电导的变化电压钳（voltage clamp）技术 直接测定动作电位期间膜对离子通透性动态变化。原理：根据通道膜电流的大小和时间，可精确测定细胞 生物电过程中，各种离子流的大小、方向和时程、方向和时程利用欧姆定律来计算膜电导。优缺点：适用于各种直径较大的细胞，只能观察膜电流的方向和幅度，不能区分那种离子电流。,电压钳技术装置,方法：负反馈电路使膜电位钳制在一个设定的水平.记录膜电流变化作为膜电导的观察指标。,实验设计根据：离子跨膜移动时形成跨膜离子电流（I），膜对离子通透性（难易程度）是膜的电阻（R）或其倒数电导

20、（G），膜电导是通透性同义词。根据欧姆定律 I=V G 固定V，测定I，作为膜电导变化的度量。记录膜电位Vm高阻抗前极放大,电导及动作电位,GNa和GK变化曲线的特点：,电压依从性，由去极化激活，GNa激活早，是动作电位上升支基础；GK激活晚，是动作电位下降支基础。GNa有失活状态而GK没有此特性,记录膜电流变化作为膜电导的观察指标：记录膜电位(Vm)高阻抗前极放大（x1）反馈放大器（FBA）电极与FBA 输出端连接，向细胞内注入电流（指令电位），FBA两者电位相等 I=0 FBA两者出现差异 FBA经电极输出端向细胞内注入电流，在膜两侧产 生趋向于指令电位变化，构成一个使膜电位=指令电位反馈

21、电 路，此时记录电流反映膜电导G的变化。,利用药理学分析膜电流的实验结果应用Na+通道阻断剂TTX（河豚毒）,内向电流消失。应用K+通道阻断剂TEA（四乙胺），外向电流消失。,膜电流的记录和分析,3.膜电导与离子通道膜片钳实验技术(Neder和Sakmann等)（1）直接观察单一的离子通道蛋白质分子对相应离子通透活动的特征.（2）记录单个离子通道开放后的电流.（3）计算出通道的开放概率和单通道电导。（4）证明在完整细胞上记录到的膜电流是许多单通道电流总和的结果，单通道的开放概率或单通道电导增加，或离子通道的数目增加，都会使膜电导增大。,70年代的膜片钳实验技术 膜片钳记录方法和单通道电流,钠

22、电 流,阈电位当剌激引起膜内去极化达到引起正反馈Na+内流的临界膜电位称为阈电位(threshold potential)。它一般比静息电位小1020mV。,动作电位上升支：1.细胞受剌激时，迅速增加Na+电导，2.动力：Na+在很强的电化学驱动力作用下，形成Na+内向电流，膜内负电位的迅速消失；3.超射:膜外Na+较高的浓度势能，Na+在膜内负电位减小到零时仍可继续内移，出现超射。4.阻力:内移的Na+在膜内形成的正电位足以阻止的Na+静移动为止；这时膜内所具有的电位值，理论上应相当于根据膜内、外Na+浓度差代入Nernst公式时所得出的Na+平衡电位值。,动作电位降支：Na+通道失活，Na

23、+电导减小形成峰电位降支，同时K+电压门控性通道的开放。在膜内电-化学梯度的作用下,出现了K+外向电流，使膜内电位变负，加速了膜的复极，参与峰电位降支的形成。后电位：正后电位一般认为是生电性钠泵作用的结果。,局部反应或局部兴奋特征：1.不表现“全或无”特征；2.不能向远处传播,只能以电紧张的方式,使邻近的膜也产生类似的去极化。电紧张扩布随扩布距离增加而衰减；3.电紧张电位(局部兴奋)没有不应期,一次阈下剌激引起一个局部反应虽然不能引发动作电位,可叠加或总和后导致膜去极化到阈电位,从而爆发动作电位。空间性总和：多个阈下刺激在相邻部位同时发生，叠加起来。时间总和：阈下剌激在同一部位连续发生，后一次

24、反应可在前一次反应 尚未完全消失的基础上发生，多个局部反应在时间上叠加。,局部反应或局部兴奋特征：1.不表现“全或无”特征；2.不能向远处传播,只能以电紧张的方式,使邻近的膜也产生类似的去极化。电紧张扩布随扩布距离增加而衰减；3.电紧张电位(局部兴奋)没有不应期,一次阈下剌激引起一个局部反应虽然不能引发动作电位,可叠加或总和后导致膜去极化到阈电位,从而爆发动作电位。空间性总和：多个阈下刺激在相邻部位同时发生，叠加起来。时间总和：阈下剌激在同一部位连续发生，后一次反应可在前一次反应 尚未完全消失的基础上发生，多个局部反应在时间上叠加。,电紧张扩布,局部兴奋与动作电位的区别:,不衰减扩布,电紧张扩

25、布,传播特点,无,有,总和现象,有,无,全或无特点,大,小,膜电位变化幅度,多,少,钠通道开放数,阈或阈上刺激,阈下刺激,刺激强度,动作电位,局部兴奋,区别,（三）动作电位的传导 无髓鞘神经纤维上的传导方式 1.某一小段纤维受到足够强的外加剌激；2.局部出现膜两侧电位的暂时性倒转；3.在已兴奋的神经段和相邻的未兴奋神经段之间，电位差的出现而发生电荷移动，称为局部电流(local current)，4.方向：巳兴奋的膜部分向未兴奋的膜部分。特点:直径大的细胞电阻较小传导的速度快。,传导机制局部电流,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,+-,-+,-+,-+,神

26、经冲动：神经纤维上传导,神经纤维,有髓鞘神经纤维上的传导方式 跳跃式传导（saltatory conduction）,（三）细胞兴奋后兴奋性的变化细胞在发生一次兴奋后，将经历一系列兴奋性的变化。,绝对不应期：当出现锋电位的时期内，不能再接受任何强大的刺激而出现新的锋电位，因而也不可能发生两次锋电位的叠加。这一时期称为绝对不应期(absolute refractory period)。处在绝对不应期的细胞，Na+通道是失活状态，细胞兴奋性降低到零。,绝对不应期之后的一定时间内，细胞对阈上剌激可发生兴奋。标志着一些失活的Na+通道已开始逐渐复活，细胞兴奋性从无到有逐渐向正常恢复的时期。,相对不应期

27、(relative refractory period)：,超常期：相对不应期之后，阈下剌激就可引起细胞再兴奋，表明此时的兴奋性轻度的高于正常。膜电位接近静息电位，相当于动作电位的负后电位后期。低常期：需用阈上剌激才能引起细胞产生动作电位，细胞的兴奋性轻度的低于正常。膜电位处于超极化状态，与阈电位距离加大。动作电位与兴奋性各时期的对应关系是:峰电位-绝对不应期，负后电位-相对不应期和超常期;正后电位-低常期。,分 期 兴 奋 性 原 因 时 间 绝对不应期 钠通道均失活 0-60 mV 相对不应期 正常 少数钠通道复活-60-80 mV 超常期 正常 多数钠通道复活-80-90 mV 低常期 正常 超极化-90 mV,1.兴奋性变化分期：,2.绝对不应期的意义：,其长短决定细胞兴奋的最高频率,例：绝对不应期 2 ms 兴奋的最高频率?,1000/2=500 Hz,使动作电位不会重合,组织兴奋后其兴奋性周期性的变化,