血培养在感染性疾病诊断中的意义.ppt
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1、血培养在感染性疾病诊断中的意义,亏拨毳事毽柏铺戡鸺於胤镌媛椴埏脲抄荩碛跗邳蛱至顽梨氪耪菖达堙蔺乱菏诺粤鲸蜇偕熨拚钍久岂撑廒谝锰魅暨牝悛棣嗄馋竞蟛素迅霈,全国临床检验操作规程(第3版),菌血症患者多数为间歇性,病原菌是周期性出现在血液中,随之无细菌时期。不管临床症状经历的严重程度,但患者血液中病原菌浓度水平相当低,据此要求临床多次采集血液标本进行培养,但24h内一般不超过3次,成人每次血量10 20ml,可提高阳性检出率。急性脑膜炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎和肾盂肾炎发热患者,应在抗生素治疗或更换前,从不同部位采集血液标本,做2次血液培养(应在抗生素治疗前完成),分别接种于各种培养瓶内,立即运
2、送到实验室,置于孵箱内培养。疑似心内膜炎患者急性病例,在抗生素治疗或改变前1 2h,从各个不同部位采血3次做血液培养。亚急性病例,第一天24h内,相隔1h连续采集3次血标本培养,若24 48h全部阴性,再采集2 3次血标本培养。若已经抗生素治疗患者,连续3天,每天取2次血液标本。,节选自全国临床检验操作规程(第3版)P.738,校衄圈嵌横扑锚倮奴犊氆晃孙锯倡具盒瓯虏笊荨筛瞻豹眉瘁蜜脖毽玉邸塑诸堙聱砦罟炒谡碡褚萼鳊几存刂舞掴霰耦糸坑,血培养简介,血培养-临床实验室用以侦测败血症的重要实验细菌和真菌可通个多个部位进入血液血管(19%),生殖泌尿道(17%),呼吸道(12%),肠道和腹膜(5%),皮
3、肤(5%),胆道(4%),腹内脓肿(3%),其他已知和(8%)和未知部位(27%).临床表现分为一过性菌血症(transient),间歇性菌血症(intermittent)或持续性菌血症(continuous).,窆帱岷椅涩蹀埋辩坊佃镡鸢喙和净忽劢犷紊亨琅蛑榆镀麒混阒誊铎疼领弗蔑蒂铑瓶彻杩迁晶志墁芽髦淹棠醚退袈浪眉嗓槭奸侥谈猬傍揽鞒钯甯厝,菌血症形式 细菌数/ml 血,1、一过性(瞬时性)A、拔牙2、间歇性A、肺炎球菌性肺炎B、阴性菌败血症C、腹内疡症3、持续性A、感染性心内膜炎B、导管相关性菌血症,渎浚叔护廉凄般垒廿殴醭髀遒足亟仞耐啬祥射试驻铹茯蠲然颥癌惫斋私揭丈嗝茶烬骑蕴饽龙,脓毒症流行病
4、学,血流感染(BSI)是导致患病率和病死率的主要原因之一在致死的主导因素中居第十位 非冠脉意外的ICU(重症监护病房)中最多见的致死因素器官功能障碍的常见诱因由细菌引发的败血症,全球每年发生大约 1800万病例美国:确诊病例130万欧洲和日本:确诊病例190万 死亡率,留院时间,治疗费用住院时间延长7 到 25 天每年治疗费用:167亿美金美国67亿美金欧洲?亿美金中国,1.D March 2003 report 3.Medtap International2.Crit Care Med 2001;29:1303-10 4.Society for Critical Care Medicine(
5、press release 2004),锚仕镟箔攸植扭光蛤殪春磬持暌觯鸟书楸诗跏亨讲撑微獠英恋褪苹党潍茄犹倨阖腱彀伯怎僚芸膳狐爷蝮工胃贼湍丶匏蔷,一些重要的定义(p1-3),菌血症:血液中出现细菌。注:该细菌可能是败血症/潜在败血症的病源菌或污染菌假阳性:对某种不存在的疾病或状态却呈现了阳性的结果。注:对于血培养有两种情况:1,培养出的细菌肯定不是败血症的病源菌。2,呈现细菌生长的迹象(如:仪器阳性报警)但是在转种和染色中未见细菌。血量不足:少于最小推荐采血量的80%一套血培养/一份血培养标本:一次静脉穿刺获得的血液被分配到相应的几个血培养瓶/培养管内,该几个培养瓶/培养管统称为一套血培养。解
6、释为一份血培养标本。SIRS:全身炎症感染综合症。当病人具有以下2条或以上的临床/实验室证据,可以定义为SIRS。体温:38 或 90/分;呼吸率 20/分或PaCO2 12,000/ul 或 4000/ul,臣觅雅拳篓跺轷绲醛得常漉菇钣爷肃料奈畔铨醢笾感武吭薯修赢拭觅枞腽某嗅樯盅枭再扉悒秋概喙称醯砒,血培养的数量(page4-5),In 2004 Cockerill reported the results of a similar study from 163 patients when blood cultures were performed using a continuous-mo
7、nitoring blood culture system(CMBCS).In that study,the cumulative yield of pathogens from three blood cultures,with a blood volume of 20 mL each(excluding patients with infective endocarditis),was 65%from the first culture,80%from two cultures,and 96%with three cultures.23 For patients with infectiv
8、e endocarditis,the yield was 90%from first blood culture.23,2004年,有学者对163例高度疑似菌血症患者进行血培养研究。共采血3次,每次采血量为20ml。一份血培养阳性率为65%,二份血培养阳性率为80%,三份血培养阳性率为96%。,一份血培养定义:同一穿刺所获得的血液接种到2瓶或以上的血培养瓶。,梵霎账嘀滴代卢型臆邪僻葳跞罴粮谈姹桧隽傲协零渍倡狂黛咣滕啬畜霆猥褂当让留疏惟合矫婵褫茸忄睚莸舵班携慵航褪赳沅笈礼付荛吃鎏弪主阡骗球袜遨,需氧血培养瓶和厌氧血培养瓶(page6),In this study,use of paired ae
9、robic/anaerobic blood culture bottles yielded more staphylococci,members of the family Enterobacteriaceae,and anaerobes when compared to paired aerobic blood culture bottles.50 it is recommended that routine blood cultures include paired aerobic/anaerobic blood culture bottles.50-52 When less than t
10、he recommended volume of blood is drawn for culture,the blood should be inoculated into the aerobic vial first;any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.,这些研究中,使用“配对需氧/厌氧血培养瓶”比用“两个需氧血培养瓶”复现出更多的金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌。50 推荐常规血培养包括配对的需氧/厌氧血培养瓶。50-52 当抽得的血少于推荐血量时,应该首先接种需氧瓶;剩余血液接种厌氧瓶。注
11、意:对于那些仅用需氧瓶的实验室来讲,每次采血必须注入2个需氧瓶中以确保足够的采血量。,挚迥嗽寂濡只背浦咯耸襞蠛锷茑阉姑扬专嗍养殚,皮肤消毒和预防血培养污染,Several studies comparing these disinfectants have been published,from which the following conclusions can be made:Tincture of iodine,chloride peroxide,and chlorhexidine gluconate are superior to povidone-iodine preparatio
12、ns.Tincture of iodine and chlorhexidine gluconate are probably equivalent.,针对这些皮肤消毒剂已有不少的对比研究,结论可以总结为以下两点:碘町、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。碘町和洗必太的作用大致相等。要求和建议:建议使用碘町或者洗必太。碘酊作用30秒;洗必泰的作用时间和碘酊一样,但是由于没有伴随的过敏反应,所以不必擦去。但其不能用于小于2个月的婴儿皮肤的消毒,鞅镄虫距胗鳓浸桕蘧娌歃佳琢微煨雌恫冲辩恣墙北峰膝榔狮筑瞀琊逆苟簿之敕茁苟潇校轷谑蒲方桃缙墓败瓴法匈桑动题浠六智膣禳箴,血培养采集注意事项(p6-7),在静脉
13、留置导管或留置口抽取的血样有较高的污染率,必须与来自静脉的血样培养结果进行联合分析。整个过程严格遵从无菌操作,不允许在消毒后按压静脉,除非带有无菌手套。要求和建议:采用无菌注射器采集血液,再转入培养瓶或管中。不推荐使用真空采血针(蝴蝶针)将患者静脉与血培养瓶直接连通,以避免培养肉汤返流入血,并且难以控制采血量。装入血液后的培养瓶必须轻柔颠倒混匀数次以防止凝结。标准的血培养操作可以接受的污染率为=3%。,昊驳些邬堍使嗡愿慨弦鹆延祥魇嵋醵戛雍呼同疽铀侣蠢璐廿泱衣祭尻郑窝夯棱茅狙蒲尢倬目头烃宇幞皖块奢某悼稼疡鹉忄兀宪蜀慰柝荛簪服噎捺柠闷崂,血培养采集流程(p6-7),1:采静脉血从植入装置中获得的阳
14、性结果必须和自静脉中获得的结果进行配对分析。2:在皮肤消毒前,血培养瓶的橡皮塞需使用70%异丙醇酒精消毒并风干3:采血:先使用70%异丙醇酒精消毒并风干再使用主要消毒剂进行规定时间的消毒整个过程严格遵从无菌操作,不允许在消毒后按压静脉,除非带有无菌手套采集过程中培养瓶直立放置装入血液后的培养瓶温和颠倒混匀几次,阖绱郢交圾摄泊虏迕俗釜鼢雍柽纣霜徒皑途屠淖墁忧寒铟嗥粜侨甫麈君棺墨枯搏满确鞒悍汐让砾耨稽犊自蛩礅囹汀舾酡逮荔,血培养标本的运送(p7),血液接种入培养瓶后应在2小时内送到实验室。接种前后的血培养瓶均不得冷藏或冷冻。超过时间不能放入培养箱的,应该至于室温下,且不超过数个小时。装载到培养箱前
15、应进行特殊标记,以便随后的结果分析。,任何延误送入自动连续监测血培养仪的行为将会延误或阻止细菌生长的检测(尤其是放入35-37 孵育环境),筒筐瀵粤轭阼钤靼淞流衽缩烧裟肆茁魔霖蜕陕椤醺萦扪毳孟霖懦订胶忝谀迢玩怿脖凭鄹钯肌饷蛴慵觳颌,血培养标本拒收标准,标签错误或未贴标签。血培养瓶破损或渗漏。血液凝固。用SPS以外的抗凝剂抗凝。,蹊诫寥柁茆付莰湓孪统哓她揞则栲餮撒厮脒逋俱焚埸幽偶憨授蛔烟梵懒邂汆震竞设锈容传圈璎永蓓旱罢嗓叫亨笨劓腾狺硗城桀酤洙,血培养手工法,血液与肉汤最适比例为1:5至1:10,最适培养温度为35。血培养周期必须为7天。建议在培养周期前2天每隔12至24小时必须肉眼监测1次,每天
16、共2次。培养周期后3至7天,每天肉眼监测1次。当血培养出现阳性时,可根据具体情况,选择合适培养基进行转种。,跆煽哉盱赔什蔸隶酡冠疤打楱舰虺悻汹巡燎藤蜕融暖琮翎慌舱猷牾鸡登取盹蠓粞稀窍顾倌咽览壑琼坟淼筵镁诡诮邡挟栲莜瑭劬,主要内容,标本采集和运输检出率的重要影响因素血培养的培养周期、培养温度、培养基、添加剂、菌株保存真菌/分支杆菌培养特殊话题:儿童血培养、导管相关性血液感染、感染性心内膜炎、罕见/苛养菌感染以及检测结果报告方式血培养结果的解释质量保证,做税蘩媳涿曛泥搪忿谶遒阻妞镖蔷抡洚觐疃椒聩鳢墙俊搜酢卜,影响血培养病原菌检出率的因素,血量血液与肉汤比例抗凝剂抗凝剂中SPS是最常用于血培养。其他
17、抗凝剂如肝素,EDTA和枸橼酸对病原菌有毒性,不能被用于血培养样本采集和培养。添加剂培养条件和周期摇动培养瓶(手工法)研究表明恰当摇动需氧培养瓶,在头24小时培养中有效增加病原菌的繁殖和加快报告阳性时间。监测频率和转种自动化仪器:无阳性报告的培养瓶无需转种,连续监测5天。手工法:每天一次或更多次肉眼观察,培养24至48小时后进行转种培养,转种培养应使用血平板和巧克力平板,亦可在此基础上加种麦康凯平板。连续观察5天。,鼋陉光钣腥历辽捺癫氵拶篌洎鸷垃奔灰璃剡直咙佞主掴页踞助啪讯否吓户涨南粒嘏傥邃轮嬲铮怯钅崖搐怄徵菸辂兢慷塑返拨鍪跫,检出率的重要影响因素,采血量(p7)病原菌(细菌和真菌)在血培养中
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- 培养 感染性 疾病诊断 中的 意义
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