如何解读细菌学检验报告(儿科).ppt
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1、,如何解读细菌学检验报告,2/77,主要内容,微生物检验项目正常菌群与病原菌药敏试验与报告解读经验用药与目标用药2011CLSI新变化标本采集注意事项,3/77,细菌引起感染的诊断,各种临床标本的细菌培养、厌氧菌培养各种标本的革兰染色血清降钙素原(PCT)检测腹泻病人大便菌群失调检测,4/77,真菌引起感染的诊断,各种临床标本的真菌培养 真菌涂片检查真菌D-葡聚糖检测、GM试验脑脊液墨汁染色隐球菌荚膜抗原乳胶凝集:诊断及疗效监测,5/77,其他病原体引起的感染诊断,肺炎支原体抗体检测肥大外斐反应检测伤寒感染抗酸染色检测抗酸杆菌,如:结核杆菌结核荧光定量PCR检测肺炎链球菌抗原测定:尿、脑脊液,
2、6/77,7/77,条件致病菌的几种身份,病原菌:会于宿主体内繁殖并侵入或破坏组织,引起感染的微生物。患者由这类菌引起感染,用细菌报告提示的抗生素治疗,疗效明显。定植菌:(定植:细菌或真菌在人体的某个部位定居下来形成相对稳定的寄生状态,不会随外界机械冲击而完全离开原来寄居部位。)会于体内繁殖但不会入侵或破坏组织的微生物。以下现象提示报告的细菌为定植菌:用细菌报告提示的抗生素治疗,该菌消失,感染症状依然存在。或是由于该菌泛耐药,临床凭经验联合用药,感染症状好转,但该菌依然存在。污染菌:留取标本过程中,污染了非感染部位的细菌。按其治疗无效,多次送检可排除。,8/77,药敏试验与报告解读,基本概念
3、药敏试验的临床价值 报告解读与相关问题,9/77,CLSI简介,临床最常用到CLSI标准文件是抗菌药物敏感性试验标准文件。本文件是针对需氧菌药敏的标准指南。其主要内容包括需氧菌纸片法和稀释法药敏试验的选药(抗菌药物分组)、结果判断标准(折点)和质量控制。CLSI根据细菌学、药动学和临床资料设定并定期修订抗生素对不同细菌敏感折点,通过折点将细菌分为敏感(S)、中介(I)、耐药(R)。,CLSI最新版本M100-S19,10/77,CLSI文件中关于敏感、中介、耐药的定义,CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Tes
4、ting;Nineteenth Informational Supplement.M100-S19 ed.2009,28(1):21.,11/77,敏感:最高血药浓度4倍MIC,使用常规剂量有效;中介:最高血药浓度MIC,加大剂量或药物浓缩部位有效;耐药:最高血药浓度MIC,无效。,12/77,CLSI推荐的药敏试验药物分组,13/77,抗生素的等效性与抗菌谱,抗生素的等效性:是指用一种相关抗生素的试验结果预测同类抗生素体内抗菌活性。如头孢噻吩与其他一代头孢具有等效性,可用头孢噻吩结果预测其他一代头孢。此特性允许检测少数几种抗生素而不影响临床对其他抗生素的广泛选择。抗菌谱:是指细菌在“野生菌”
5、状态下能被抗生素在体内达到有效浓度时抑制的种类。这些细菌称为对该抗生素的天然敏感菌。未列在抗菌谱中的细菌则为天然耐药菌。,14/77,细菌的耐药性,细菌耐药性:是细菌抵抗抗菌药物杀菌、抑菌作用的一种防御能力,一种生物学的表型。天然耐药(固有耐药):耐药性为某种细菌固有的特点称细菌的天然或固有耐药性。天然耐药非常稳定,据此就可预测某一细菌或可能存在的细菌对某种抗生素是否耐药。获得性耐药:由于细菌获得耐药基因,使原来敏感的细菌变为耐药称细菌的获得性耐药。获得性耐药是目前临床面临的最主要的耐药问题。由天然敏感菌基因突变或获得一段基因片段,使其基因型改变而产生耐药。获得性耐药不断在变化(其变化频率与抗
6、生素应用相关),不能预测,需要做药敏试验。,15/77,常见细菌的天然耐药情况,马越,李景云,金少鸿.细菌耐药性监测分析中应注意的问题.中国抗生素杂志,2005,30(12):763,16/77,3.报告解读与相关问题,报告单简介 药敏试验药物选择 特殊耐药机制的解读 阴性报告结果的解读 各种标本阳性结果的解读 相关问题与临床可能的抱怨,17/77,18/77,19/77,药敏试验药物选择,药敏试验药物选择原则 代表药物在药敏试验中的作用,20/77,药敏试验药物选择原则,代表性:所选药物应具有代表性及对同类药物有提示作用,同类药物通常只选择一种或几种代表品种;预报性:选择药物可对抗菌药物使用
7、或耐药机制有提示作用。如金葡菌对苯唑西林耐药提示对所有-内酰胺类耐药;革兰阳性球菌耐庆大霉素提示对氨基糖苷类耐药;肺炎链球菌选择苯唑西林提示青霉素耐药性。如大肠和克雷伯菌药敏中选三代头孢(头孢他啶、头孢噻肟)或氨曲南可提示细菌是否产ESBLs;在肠球菌药敏中选高浓度庆大霉素或链霉素可提示能否采用联合用药方案。特殊性:选择感染部位有较高浓度的抗菌药。如尿路感染的尿液标本可选择呋喃妥因,中枢神经系统感染的脑脊液可选氯霉素、头孢呋辛等(能通过血脑屏障)。,21/77,代表药物在药敏试验中的作用代表性,代表性药物在药敏试验中的作用不仅仅局限于该药物本身,还代表与其相关的抗菌药物,22/77,代表药物在
8、药敏试验中的作用预报性,23/77,倪语星,王金良.抗微生物药物敏感性试验规范.上海:上海科学技术出版社,2002,7-8.,24/77,特殊耐药机制的解读,常见特殊耐药表型ESBLs(产超广谱内酰胺酶)MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)包括MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)和MRSCN(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌)BL(产内酰胺酶)HLAR(高水平氨基糖苷类耐药肠球菌)AMPC酶碳青酶烯酶,25/77,特殊耐药机制的解读,CLSI 规定不能报敏感的抗菌药和细菌组合,CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testi
9、ng;Nineteenth Informational Supplement.M100-S19 ed.2009,28(1):23.,26/77,阴性报告结果的解读,阴性报告提示以下可能非感染性疾病感染已治愈感染未治愈,但各种原因导致病原体未检测出来采样运送不当:标本采集、送检、保存不当,导致病原菌死亡,污染菌大量增殖;抗生素影响:经抗菌治疗,标本中含大量抗生素,病原菌受到伤害,不能正常生长;苛养菌:如嗜血杆菌、军团菌、淋球菌等因培养基营养成份不佳或培养条件限制,导致漏检;特殊病原体:常规培养无法检测的病原体如厌氧菌、结核杆菌、衣原体、支原体、病毒等。检验技术受限:实验室条件和人员技术影响。,2
10、7/77,血培养阳性结果的解读,临床因素病史、体征、白细胞计数、影像学、病程、其它部位的培养结果实验室因素微生物鉴定血培养阳性率(阳性瓶/总数)每套血培养阳性的瓶数微生物阳性检出时间菌株种类(如凝固酶阴性葡萄球菌)分子分型技术(如脉冲场凝胶电泳)传统方法(生化、抗菌谱),28/77,痰培养阳性结果的解读,痰培养结果包括:涂片染色结果、分离致病菌的鉴定结果、药敏试验结果。痰涂片革兰染色报告的内容白细胞和鳞状上皮细胞数量。包括白细胞和鳞状上皮细胞数/低倍镜、细胞内是否含有细菌和胞内细菌染色及形态学特性。细菌学镜检的描述性报告。痰标本直接涂片的目的和意义评价标本质量。判别标本是否适合做细菌培养。初步
11、判定病原菌。判断病原菌的有无、数量及其类别。有助于初步报告、选择培养基和对培养结果的综合分析。,29/77,痰培养阳性结果分析,常见有三种情况第一种情况:患者有典型的呼吸道感染症状,按细菌报告选抗生素疗效明显这类患者的痰标本共同特征:痰涂片革兰染色:见大量的白细胞,并见白细胞吞噬或伴行大量形态一致的非上呼吸道正常菌;痰培养:生长大量非上呼吸道正常菌,痰培养与痰涂片所见一致结论:报告的细菌为病原菌。,30/77,痰培养阳性结果分析,第二种情况:患者有典型的呼吸道感染症状,按细菌报告选用的抗生素治疗无效,改为凭经验联合用药这类患者痰细菌检验时有如下特征:痰涂片:大量白细胞,吞噬或伴行的是革兰阳性球
12、菌(形似葡萄球菌)、革兰染色阴阳不定的小球菌或杆菌(形似厌氧菌)、出芽的念珠菌,偶见革兰阴性杆菌;痰培养:生长大量阴性杆菌,痰涂片所见的大量细菌不生长或少量生长,痰涂片镜检与痰培养结果不一致。结论:报告的细菌为定植菌,31/77,痰培养阳性结果分析,第三种情况:患者的感染已基本治愈,做痰检的目的是希望得到一张阴性报告作为停止治疗、出院的凭证这类患者的痰做细菌检验时的特征:痰涂片:显示标本来自上呼吸道,大量上皮细胞,大量阴性杆菌,少量白细胞。痰培养:生长大量阴性杆菌,较常见的是绿脓杆菌和不动杆菌结论:报告的细菌为定植菌。,32/77,痰标本细胞学筛选标准,近年来推荐判别标本合格的简单方法是痰标本
13、涂片镜检10个白细胞低倍镜,就可判断是基本合格并可用于细菌培养的标本,尤其是白细胞减少的患者。,全国临床检验操作规程第2版,461页,33/77,肺部细菌性感染病原诊断:确定意义,血或胸液培养到病原菌 纤支镜或人工气道吸引标本 细菌105cfu/ml(2+)BALF(支气管肺泡灌洗液):细菌104cfu/ml(1-2+)PSB(防污染样本毛刷)、PBALF(防污染灌洗):细菌103cfu/ml(1+),34/77,肺部细菌性感染病原诊断:有意义,合格痰标本培养致病或条件致病菌3+少量生长,但与镜检结果一致(肺球、流感、卡他莫拉菌)入院3天内多次培养到相同细菌,35/77,肺部细菌性感染病原诊断
14、:无意义,痰培养到上呼吸道正常菌草链、表葡、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌等多种病原菌少量(+)生长不符上述“确定”和“有意义”条款,36/77,尿培养阳性结果的解读,37/77,尿培养阳性结果的解读,以下因素可使尿液中细菌数量减少,判断结果时应予以注意:使用抗生素治疗,细菌生长受到抑制;尿液稀释,尿比重 8.5,细菌生长受阻;尿频时,膀胱内细菌停留时间短,菌落数减少;尿道口消毒液混入标本中,影响细菌繁殖,菌落数减少;不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同,菌落计数有所不同。,38/77,粪便培养阳性结果的解读,引起腹泻的原因:1.细菌感染2.食物中毒3.菌群失调,39/77,抗生素相关性腹泻的实
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