风湿免疫系统的临床常用实验室诊断技术.ppt
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1、风湿免疫系统的临床常用实验室诊断技术,1 一般实验室检查,血常规尿常规血沉C反应蛋白免疫球蛋白+补体抗O+类风湿因子尿酸,1.1.1 RA常见血常规变化,贫血:主要为慢性病贫血(约3/4)白细胞减少:多见于服用环磷酰胺(CTX)、硫唑嘌呤(AZP)、金制剂等药物后。血小板的变化:RA患者血小板常增高,其程度与患者关节炎症及血浆中存在某些急性相蛋白有关。Felty综合征:多发生于长期类风湿因子阳性、有关节畸形的患者,其特点为脾肿大和中性粒细胞减少。,1.1.2 SLE常见血常规变化,贫血:包括慢性病贫血、缺铁性贫血、自身免疫性溶血性贫血、骨髓增生低下性贫血、失血性贫血、脾亢引起的贫血和肾性贫血等
2、。白细胞变化:可有中性粒细胞减少或淋巴细胞减少或二者均减少。原因:骨髓抑制、脾亢、药物作用。血小板减少:尤其易见于抗心磷脂抗体阳性患者。血栓形成:约半数出现于抗狼疮凝集物阳性患者。,1.1.3 其它风湿病血常规变化,抗磷脂抗体综合征:血小板减少;干燥综合征:约21%可有轻度正常细胞性贫血,少数可有白细胞减低及血小板减少。血管炎:反应急性期炎症时可出现贫血、白细胞增多或血小板增多;97%变应性肉芽肿性血管炎患者嗜酸性粒细胞增多,激素治疗后可恢复。,1.2常见风湿病患者尿常规变化,SLE患者可出现血尿、蛋白尿和管型尿等干燥综合征患者可出现肾性糖尿、氨基酸尿或蛋白尿,亦可因肾小管酸中毒出现反常性碱性
3、尿类风湿关节炎、硬皮病及小血管炎亦常出现肾脏损害,1.3 血尿酸,有助于诊断痛风性关节炎对已确诊的患者,追踪检查血和尿尿酸水平则有助于判断药物治疗效果。,2 风湿病专科检查,临床免疫学检查骨与关节的影像学检查包括关节MRI、血管MRI、关节CT检查、血管造影、骨扫描等;遗传学检查:HLAB27病理检查:肾活检(免疫组织化学)、皮肤狼疮带、唇腺活检、血管活检、淋巴结活检等;关节镜检查;其他:骨密度、角膜荧光染色、泪膜破裂试验、Schirmers试验、唾液流量、关节液检查等。,2.1 临床免疫学检查,包括抗核抗体谱、抗ds-DNA抗体、抗ENA抗体、抗中性粒细胞胞浆抗体、抗血小板抗体、抗心磷脂抗体
4、、类风湿因子、抗核周因子、抗角蛋白抗体、抗线粒体抗体、抗平滑肌抗体、补体、T淋巴细胞亚群等;,2.1.1常见风湿病患者免疫球蛋白及补体变化,SS患者免疫球蛋白均可增高,主要为IgG,其水平与病情活动相关;SLE患者常出现补体降低,以C4为主,其水平与病情活动性相关,2.1.2 RF的意义,作为类风湿关节炎(RA)的筛选试验有一定的价值,至少75的患者RF()。美国风湿病学会(ACR)RA诊断标准:RF()是7条之一。对于RA而言并不具特异性。()并不能除外RA,而()也不能因此确诊。其滴度可随病情变化而改变与疾病预后相关,其它类风湿因子阳性情况,正常人及部分60岁以上老年人,但滴度不高其它风湿
5、病:SLE、干燥综合征及硬皮病等急性病毒感染、流感、肝炎、单核细胞增多症以及免疫(疫苗)注射寄生虫感染、如疟疾及丝虫病等慢性炎性疾病:如结核病、麻风、雅司、梅毒及亚急性细菌性心内膜炎等肿瘤,尤其在放疗与化疗后更明显其它高免疫球蛋白血症状态:如冷球蛋白血症、慢性肺部或肝脏疾病、高丙种球蛋白血症性紫癜等。,抗核抗体抗DNA抗体抗核糖体P抗体抗组蛋白抗体抗ENA抗体抗Sm抗体抗U1RNP抗体抗Ro/抗SSA抗体抗La/抗SSB抗体肌炎特异性抗体(MSA)抗合成酶抗体抗SRP抗体抗Mi2抗体与系统性硬化相关的抗体抗拓扑异构酶1抗体抗着丝点抗体(动粒)抗核仁抗原的抗体,抗中性粒细胞胞质抗体C-ANCAP
6、-ANCA抗磷脂抗体狼疮抗凝物抗心磷脂抗体2糖蛋白 抗Ku抗体抗内皮细胞抗体抗角化上皮抗体抗核周因子抗体抗CCP抗体,风湿科疾病常见自身抗体,2.1.3,RF分型,分IgG、IgM和IgA三型IgG-RF常见于有类风湿结节、类风湿血管炎及高滴度IgM RF的RA患者,在正常人以及非RA疾病患者难以检测出。IgM-RF明显升高者与RA病情活动及类风湿血管炎相关。IgA-RF可见于10%的RA患者,常见于高低度的IgM-RF患者,其水平和RA关节炎严重程度、骨质破坏、粘膜外分泌腺症状强相关。,抗 RA33,1989 年 Hassfeld 发现,诊断RA敏感性25%-40%,特异性90%左右,有助于
7、R早期诊断,与患者年龄、性别、病程、病情活动及药物治疗均无关。,抗环瓜酸肽抗体(抗CCP抗体),2000年Schellekens人工合成环瓜氨酸肽用于检测RA(Arthritis Rheum,2000;43:155)诊断RA敏感性68%,特异性98%,可出现于RA早期,是诊断早期RA的良好指标之一,阳性者出现侵袭性关节炎的概率远大于阴性者。在青少年特发性关节炎(JIA)中的检出率(2%)明显低于成人RA,且与病情活动、关节破坏无相关,对JIA诊断及病情评估无意义。,ANCA:MP0&PR3,ANCA:抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody)
8、,以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原,阳性荧光染色模型可分为胞质型(cANCA)和核周型(pANCA)。pANCA的靶抗原主要为MPO(髓过氧化物酶,myeloperoxidase);cANCA的靶抗原主要为PR3(蛋白酶3,proteinase 3)。,MP0,主要与MPA、NCGN、过敏性肉芽肿性血管炎(Charg-Staus syndome,CSS)相关。尚可见于PAN、抗肾小球基底膜疾病、WG、SLE、RA、DIL和Felty综合征等疾病。阳性与病情活动相关,可用于判断疗效、估计复发和指导治疗。与RA的关节外损害及血管损害有相关性。,PR3,与WG密切相关,诊断WG的特异性大于90
9、%,加上MPO则其特异性大于95%。抗体效价与病情活动一致,可用于判断疗效、指导治疗。偶见于显微镜下多血管炎(microscopic polyangitis,MPA)、坏死性新月体肾小球肾炎(necrotizing and crescentic glomeralonephritis,NCGN)、结节性多动脉炎(polyateritis nodosa,PAN)等其它原发性血管炎中。,GBM,GBM抗体是抗基底膜抗体型肾小球肾炎特异性抗体。出现于Goodpasture综合征、急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎患者,患者可伴有或不伴有肺出血。抗肾小管基底膜自身抗体也可见于药物诱导的间质性肾炎,
10、但它在发病中的作用不明。GBM抗体阳性的患者约50病变局限于肾脏,另50有肾脏和肺部病变。仅有肺部病变的抗GBM抗体阳性者非常少见。检测Goodpasture综合征患者血清中自身抗体对诊断和治疗均非常重要。约15左右患者有GBM抗体,但绝大多数有ANCA。抗体检测有助于判断预后,GBM抗体阳性者预后最差,其次是PR3相关性韦格纳肉芽肿和MPO相关性显微镜下多血管炎。,抗核抗体(Antinuclear Antibody,ANA),ANA,采用间接免疫荧光法(IIF)进行测定。已成为系统性红斑狼疮(SLE)的标准筛选试验。ACR提出了11条SLE的诊断标准,ANA()为其中之一。95的SLE患者A
11、NA()。,ANA,试验中()结果的出现率取决于以下因素:分析系统区分血清()与()的选定的滴度值技术人员的水平与疾病的活动度并不相关。滴度本身并没有评价预后的意义。ANA()可出现在多种情况下。,ANA()的原因,风湿性疾病SLE多发性肌炎干燥综合征硬皮病血管炎RA正常的健康人女性男性,出现率随年龄而增加风湿性疾病患者亲属孕妇,药物诱导肝脏疾病肺部疾病慢性感染血液系统异常恶性肿瘤,SLE患者使用IIF法测定ANA呈()的一些解释,技术方面临床方面未生成ANA。经皮质激素或免疫抑制剂治疗。终末期肾病。隐蔽的ANA:与循环中免疫复合物结合,沉积于组织。由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。,ANA的 荧光
12、类型,ANA试验的结果中一般会报告其分型,这些分型可能与某一特定的抗原反应活性相关。,核仁型(nucleolar),均质性(homogeneous),周边型(rim,核膜型membranous),斑点型(speckled),抗dsDNA抗体,主要见于SLE,是目前公认的SLE高度特异性抗体,被列为诊断标准之一;未治疗的SLE患者中,抗dsDNA抗体的诊断特异性为90%,敏感性为70%;70%的系统性红斑狼疮患者在其疾病的某些阶段都会出现抗dsDNA抗体;在具有抗dsDNA抗体的人中,有85会在约5年内发展成SLE;抗体效价与疾病活动度相关;干燥综合征、药物性狼疮、混合性结缔组织病等其他CTD患
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