血小板检测 第二节 血小板检验.ppt

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1、血小板检测,概述,血小板计数,第二节 血小板检验,血小板形态学检查,。,血小板产量,血小板寿命,血小板作用,Plt检查,概述,血小板计数,上页,概 述,血小板调节,.,血小板生成,形态学检查,Plt调节,1、促进PLT生成的因子：IL-1、IL-3、IL-6、IL-7(WBC介素-1、3、6、7)粒-单细胞集落刺激因子（GM-CSF）巨核细胞集落刺激因子（Meg-CSF）血小板生成素（TPO）2、抑制PLT生成的因子：乳铁蛋白、酸性异铁蛋白、前列腺素E、干扰素等通过上述调节因子来调节Plt生成与破坏的动态平衡。,PlT生成,PlT寿命,PlT产量,PlT作用,上页,概述,PlT生成,PlT寿命

2、,概述,多能干细胞,巨核细胞系 祖细胞,原巨核细胞,幼巨核细胞,Plt,（1.52.5天后释放至血循环中）,颗粒型巨核细胞,血循环,自由交换,脾 窦,Plt生成,裸核,PlT产量,PlT作用,上页,髓系干细胞,发育,产PLT型巨核细胞,血小板产量,每天产生血小板的量相当于每升血中增加35109个,PlT生成,PlT寿命,PlT产量,PlT作用,上页,概述,血小板寿命,约有714天（生物半衰期只有3天）,PlT生成,PlT寿命,PlT产量,PlT作用,上页,概述,血小板作用,止血过程中的作用：主要与血管共同完成，包括粘附、聚集功能和释放反应等凝血过程中的作用：主要依靠血小板的各种因子来完成，其中

3、最重要的是血小板第3因子（PF3）,PlT生成,PlT寿命,PlT产量,PlT作用,上页,概述,血小板计数,方法学评价,临床意义,Plt检查,概述,PlT计数,上页,血小板计数（目视计数法）,。,血小板计数（目视计数法）,原 理：与白细胞计数基本相同。不同点：计数中央大方格内5个中方格的Plt数。,Plt计数,方法学评价,临床意义,上页,PLT目视计数法,血小板计数（目视计数法）,国内最常用的血小板直接计数法:1、草酸铵溶血法（首选）2、复方尿素溶血法（次选）无论是自动血液细胞分析仪法或显微镜计数法，多以草酸铵溶血法作为参考方法，国内将其作为首选方法。,Plt计数,方法学评价,临床意义,上页,

4、PLT目视计数法,血小板计数（草酸铵溶血法）,操作：1、取20l血液加入o.38ml草酸铵稀释液中，混匀后，静止10min；2、将混悬液充入计数室，将计数室置于保湿平皿内静止1520min；3、在高倍显微镜(或在放大100倍位相显微镜)下精确计数中央大方格中5个中方格内的血小板数。,Plt计数,方法学评价,临床意义,上页,PLT目视计数法,血小板计数（草酸铵溶血法）,注意事项：1全部器材和稀释液要特别清洁，血小板稀释液空白计数值应为0。2刺血一定要深(3mm)，血液应自然流出，避免挤压，动作要快，以防止血小板聚集。,Plt计数,方法学评价,临床意义,上页,PLT目视计数法,血小板计数（草酸铵溶

5、血法）,3必须充分混匀后，滴入计数池中，至少静止15min（Plt完全下沉），才能进行计数。并要求在采血后1h内计数完毕，否则PLT结果降低;4计数时光线要适中，不可太强，应随时旋转显微镜微调，注意与细胞碎屑、微生物、结晶等杂物鉴别。,方法学评价,临床意义,上页,PLT目视计数法,Plt计数,方法学评价,目视 计数 法,血细胞分析仪法,方法学评价,临床意义,Plt计数,上页,PLT目视计数法,.,目视计数法,目视显微镜计数法,普通显微镜法,相差显微镜法,直接法,间接法,破坏RBC,不破坏RBC,草酸铵法（首选）,许氏尿素法（次选）,复方碘稀释液,ACD保养液,生理盐水,用草酸铵稀释液，在相差显

6、微镜下计数Plt：此法准确性高，Plt易识别。,目视计数法,血C分析仪法,方法学评价,上页,下页,目视计数法,草酸铵法（首选）,许氏尿素法（次选）,对RBC破坏力强，Plt形态清晰,应急时用,易长微生物，干扰Plt计数（已被淘汰）,由于不破坏RBC，RBC可掩盖Plt，影响Plt计数。,尿素易分解，有时不能完全溶解RBC,上页,下页,方法学评价,目视计数法,血C分析仪法,血细胞分析仪法,优点：重复性好，适于临床使用。缺点：仪器不能区分PLT与其他类似大小的物质,如：RBC碎片、WBC碎片、灰尘等杂物（原因后述），因此，有时仍需目视法做校正，因而国外仍然将目视法（特别是相差显微镜法）作为参考方法

7、。,上页,方法学评价,目视计数法,血C分析仪法,临床意义,生理性,病理性,参考值,Plt计数,方法学评价,临床意义,上页,参考值,普通显微镜计数法：（100300）109/L,临床意义,生理性,病理性,参考值,上页,生理性,正常人Plt一天内可有610%的波动表现为：,生理性,病理性,临床意义,低 高早 晨下 午春 季冬 季平原居民高原居民月 经 前月 经 后,参考值,上页,生理性,高 低妊娠中晚期分娩后运 动 后休息后动 脉 血静脉血静 脉 血 cap血10%,临床意义,生理性,病理性,参考值,上页,病理性,1.Plt：,在临床上，除创伤外，Plt是引起出血的常见原因，当Plt50109/L

8、时，可有出血症状，常见的疾病有：,临床意义,生理性,病理性,参考值,上页,病理性,1）Plt生成障碍：如急性白血病、再障；2）Plt破坏过多：如原发性血小板减少性 紫癜（ITP）、脾亢、SLE；3）Plt消耗增多：如DIC、血栓性血小 板减少紫癜；,1.Plt：,临床意义,生理性,病理性,参考值,上页,病理性,见于：1）骨髓增生性疾病：慢粒、真性RBC 增多症；2）原发性血小板增多症；,2 Plt：Plt400109/L,临床意义,生理性,病理性,参考值,上页,病理性,2 Plt：Plt400109/L,3）急性大出血、急性溶血、急性 化脓性感染；,4）脾切除术后；,临床意义,生理性,病理性,

9、参考值,上页,血小板形态学检查,1 血小板形态的检验重要性,2 镜下血小板形态观察的内容,3 血小板形态变化及意义,.,Plt检查,概述,血小板计数,上页,形态学检查,血小板形态的检验重 要 性,血小板的形态与功能密切相关。通过血小板形态的检验，对疾病的诊断、鉴别诊断以及发病机制的探讨，都有十分重要的意义。,形态学检查,重要性,观察内容,上页,形态变化及意义,镜下血小板形态观察的内容,先低倍镜选着色及分布良好的部位，转油镜检查。观察的内容：1、PLT数量、大小如何；2、PLT形态有无改变，胞质染色是否正常，颗粒有无、多少、粗细、分布情况，有无空泡等。且应估计正常和异常PLT的数量；3、血小板的

10、分布情况；4、必要时作PLT分类(根据其大小和形态)计数，一般应计数500个PLT，统计各型比值。,形态学检查,重要性,观察内容,上页,形态变化及意义,血小板形态变化及意义,1大小的变化,2形态的变化,3血小板分布情况,.,重要性,观察内容,上页,形态变化及意义,形态学检查,血小板大小的改变,正 常 血 小 板,小 型 血 小 板,大 型 血 小 板,巨大型血小板,.,大小,形态,上页,分布,形态变化及意义,正常血小板,直径23m，正常人约占44.3一49见于：ITP、脾亢、溶贫，缺铁性贫血等；在正常人末梢血中有一定比例的小、大、巨型PLT；小型PLT比大型PLT更富有聚集作用，故功能活跃。而

11、大型或巨大 型PLT常无粘附和聚集功能。,正常,小型,上页,巨大型,大小改变,大型,小型血小板,平均直径1.5m，正常约占3347见于:再障等,正常,小型,上页,巨大型,大型,大小改变,大 型 血小板,平均直径4.6m，正常约占816提示：骨髓造PLT功能旺盛，但有成熟障碍、破坏加速的表现,正常,小型,上页,巨大型,大型,大小改变,巨大型血小板,平均直径大于7.5 m，正常约占o.72见于血小板无力症、血管性假性血友病、继发性血小板增多，偶见ITP。,正常,小型,上页,巨大型,大型,大小改变,血小板形态变化,成熟型血小板,幼稚型血小板,病理性幼稚型血小板,.,衰老型和病理刺激型血小板,无颗粒型

12、血小板,形态变化及意义,大小,形态,上页,分布,血小板形态变化的意义,成熟型血小板,呈圆形、椭圆形或不规则形，胞质向外伸出多个丝状树突，胞浆呈淡蓝色，含有许多紫红色颗粒。正常人约占90以上,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,形态改变,无颗粒,幼稚型血小板,正常占o.55见于急性失血之后及血小板无力症等。,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,无颗粒,形态改变,病理性幼稚型血小板,体积较大，呈圆形，胞膜无丝状“树突”伸出，胞质蓝色，颗粒缺乏，为未成热巨核细胞所脱落；正常人见不到。：见于特发性和反应性血小板病。当骨髓巨核细胞增生时，尤其在特发性血小板减少性紫癜出现PLT减少危象和粒细胞性白血病时，可以

13、见到大量蓝色和巨大的血小扳。,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,无颗粒,形态改变,病理性幼稚型异形血小板,慢性中性粒细胞性白血病,特发性血小板减少性紫癜,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,无颗粒,形态改变,衰老型和病理刺激型血小板,衰老型：增多常见于恶性贫血。病理刺激型：血小板直径2030 m，形态多变，胞质蓝色或紫蓝色、颗粒多、大小相似；正常人偶见；增多常见于骨髓受到严重刺激、血小板无力症等。,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,无颗粒,形态改变,无颗粒型血小板,见于灰血小板综合症（提示骨髓纤维化）正常未见,正常,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,无颗粒,形态改变,血小板形态变化的意义,正常人

14、也可见到少量形态不规则或畸形的血小板，但所占比值一般少于2。由于影响血小板形态的因素很多，各种改变又无特异性，因此只有异常血小板的比值超过10时才考虑它的临床意义。,成熟,幼稚,上页,衰老,病理幼稚,无颗粒,形态改变,血小板分布情况,血小板正常分布,血小板过度聚集,血小板散在分布,.,形态变化及意义,大小,形态,上页,分布,血小板正常分布,功能正常的血小板因有树突相互粘附凝集在一起，常见35成群、成堆、成片出现，散在血小板极少见聚集与散在血小板之比为201。,分布情况,正常分布,过渡聚集,上页,散在分布,血小板过度聚集,在冠心病、原发性血小板增多症(ET)或继发性血小板增多症等病变时，PLT可

15、4050个成群成堆出现，甚至超过100个，数百数千个PLT成群成堆成片聚集一起占满整个油镜视野。,正常分布,过渡聚集,上页,散在分布,分布情况,血小板过度聚集,血小板过度聚集出现，提示PLT功能异常，常引起局灶性或全身性的栓塞病理改变。,原发性血小板增多症,正常分布,过渡聚集,上页,散在分布,分布情况,血小板散在分布,在再障、特发性血小板减少性紫癜时，PLT粘附聚集减少。在血小板无力症时，血小板散在分布，则不出现聚集现象。出现血小板散在分布，提示PLT功能异常，常发生出血现象。,正常分布,过渡聚集,上页,散在分布,分布情况,概述,多能干细胞,巨核细胞系 祖细胞,原巨核细胞,幼巨核细胞,Plt,

16、成熟巨核细胞,胞浆脱落,TPO,裸核型,髓系干细胞,GM-CSF、IL-3Meg-CSF,Plt生成,颗粒型,产血小板型,上页,Plt生成,巨核细胞的增殖与其他系统不同，其他系统细胞在DNA合成后，随即分裂成两个子细胞。而巨核细胞则是以连续双倍增值DNA的方式，即细胞核成倍增殖，每增殖一次，核即增大一倍，而胞浆并不分裂，故巨核体积逐渐增大，形成多倍体细胞，多为16N(76%)和32N（）巨核细胞，胞浆脱落形成Plt，余下裸核。,Plt计数,概述,PlT计数,上页,血小板计数（间接法）,在血片中计数PLT10油镜视野 2000 个PLTl用于核对人工计数结果，当两者不吻合时，必须重新计数。由于该法影响因素较多，故不能用此法直接计数PLT。,