疟疾镜检培训.ppt

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1、,全球基金疟疾镜检项目培训班,疟原虫属原生动物亚界的单细胞真核生物。在生物界的位置：疟原虫为原生动物门、孢子纲、血孢子目、疟原虫科、疟原虫属。疟原虫有149种，自然界感染人体的疟原虫只有四种：即间日疟（Pv）、恶性疟（Pf）、三日疟（Pm）、蛋形疟（Po）四种。,一、概述,二、疟原虫生活史,红细胞外期红细胞内期子孢子增殖期,二、疟原虫生活史,In mosquito(final host)配子体 配子Gametocytes()gametes()(bloodstomach)(stomach of insect)union of 合子zygote rupture/release rounds up

2、into 子孢子卵囊 动合子sporozoites oocyst motile ookinete(Salivary glands)(the body cavity side),二、疟原虫生活史,In human body 红细胞外期（红外期）Exoerythrocytic stage 子孢子 bite/inject into 红外期裂殖体 sporozoites exoerythrocytic schizonts(mosquito blood)(hepatic cell)rupture/release 红外期裂殖子exoerythrocytic sporozoites(blood),二、疟原虫

3、生活史,红细胞内期（红内期）Erythrocytic stage 早期滋养体 晚期滋养体 early trophozoite later trophozoite P.f/36-48hrs P.v/48hrs 裂殖子 未成熟裂殖体 merozoite immature schizont 成熟裂殖体 Mature schizont*the process from trphozoite to merozoite is called schizogony（裂体生殖）.,二、疟原虫生活史,配子体形成 Gametgenesis 疟原虫经几代红内期裂体增殖后，部分裂殖子侵入红细胞后不再进行裂体增殖而发育成

4、雌、雄配子体。配子体的发育在肝、脾、骨髓等器官的血窦内进行，成熟后释放于外周血。,致病 Pathogenicity,发作 Paroxysm(attack of malaria)疟疾的一次典型发作表现为寒战、高热和出汗退热3个连续阶段。发作是由红内期的裂体增殖所致。成熟裂殖体胀破红细胞后，裂殖子及红细胞碎片进入血流，部分被巨噬细胞、中性粒细胞吞噬，刺激这些细胞产生内源性热原质，它和疟原虫的代谢产物共同作用于宿主下丘脑的体温调节中枢，引起发热。随着血内刺激物被吞噬和降解，机体通过大量出汗，体温逐渐恢复正常，机体进入发作间歇阶段。,致病 Pathogenicity,由于红内期裂体增殖是发作的基础，发

5、作具有周期性，与红内期裂体增殖周期一致。p.v.48 hrs;P.f./36 to 48 hrs;P.m./72 hrs Process to shows a succession of 3 stages.寒战 The cold stage(chill),lasting for 30 min to 1 hr.发烧 The hot stage(fever),1 to 4 hrs.(3).出汗 Sweating stage，1 to hrs.Characteristic-(1).周期性 periodic(2).重复性 repeated(3).规律性 regular,致病 Pathogenicity

6、,再然 Recrudescence 疟疾初发停止后，患者若无再感染，仅由于体内残存的少量红内期疟原虫在一定条件下重新大量繁殖又引起的疟疾发作，称为疟疾的再燃。再燃与宿主抵抗力和特异性免疫力的下降及疟原虫的抗原变异有关。,致病 Pathogenicity,复发 Relapse 疟疾复发是指疟疾初发患者红内期疟原虫经药物治疗或宿主的免疫作用被消灭，经过一段时间，由于肝细胞内休眠的迟发型子孢子复苏，发育产生的裂殖子进入红细胞繁殖引起的疟疾发作。恶性疟原虫无迟发型子孢子，因而只有再燃而不引起复发。问日疟原虫既有再燃又有复发。,致病 Pathogenicity,贫血 anemia 疟疾发作数次后可出现贫

7、血，以恶性疟为甚。贫血的原因有：疟原虫直接破坏红细胞外。脾功能亢进，吞噬大量正常的红细胞。免疫病理损害（怎样损害红细胞）。骨髓造血功能受抑制。,致病 Pathogenicity,脾肿大 Splenomegaly 初发患者多在发作34天后，脾开始肿大，长期 不愈或反复感染者，脾肿大十分明显。主要原因是脾充血和单核-巨噬细胞的增生。,致病 Pathogenicity,恶性疟疾(凶险性疟疾)Malignant malaria-凶险型疟疾绝大多数由恶性疟原虫所致。常见于无免疫力或因各种原因延误诊治的疟疾患者，因血中原虫数量剧增而出现凶险症状。常见的有脑型、超高热型等，多表现为持续高热、抽搐、昏迷、重症

8、贫血、肾功能衰竭等，来势凶猛，若不能及时诊治，死亡率很高。,三、疟疾的实验室诊断病原学诊断：显微镜血涂片查见疟原虫，这种镜检确诊 最可靠。免疫学诊断：循环抗体检测 循环抗原检测分子生物学技术：PCR和DNA探针已应用于疟疾的诊断。确诊疟疾的“金标准”仍然是血液显微镜检查。,四、疟原虫的镜检技术,血膜的制作与染色。厚、薄血膜中间日疟、恶性疟各期疟原虫的形态结构及其鉴别要点。,四血膜的制作,在制作血片前，首先要核对患者的姓名、年龄和住址，详细进行编号。,四血膜的制作（所需设备）,载玻片：新玻片浸入有液态洗涤剂的清水中10-20分钟，干净棉巾逐个擦拭，再用清水冲洗干净，晾干，最后用干净柔软的棉巾将玻

9、片擦亮。已用过的玻片浸泡于洗涤剂溶液中1-2天，或浸泡于煮沸的5%肥皂水中1-2小时，在放置新配置的洗涤剂溶液中1-2小时，逐个擦去血膜痕迹，清水漂洗干净、擦亮。采血针：一次性。玻片盒：防止污染和昆虫吸食血膜。75%酒精棉球：采血前后消毒。记号笔：薄片上书写号码。,四血膜的制作（取血时间）,采血时间：现症病人和流调普查时可不考虑采血时间，但在诊断或需要某时期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的采血时间。疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗期和间歇期五期。间日疟在前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜检多为阴性；发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体胀破红细胞期，镜检多见裂

10、殖体和环状体；发热期外周血中以环状体（小滋养体）为主；出汗期因原虫密度太低，镜检多为阴性；发作后数小时，间歇期外周血中以大滋养体为主，形态较易辨认，为诊断的有利时机。发作36-48小时可检出裂殖体；发作1-2次后，配子体出现较多。恶性疟较理想的取血时间是发作后20小时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。,四血膜的制作（取血的部位和方法）,耳垂或无名指：通常在耳垂取血，先用75%酒精棉球消毒取血部位，待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方或无名指指尖，右手持消毒针迅速刺入皮肤，不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻挤压出血。厚血膜血量约一粒大米（即火柴头）大小,四血膜的制作（取血的部位和方法）,四

11、血膜的制作（制片）,用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂成薄膜状，叫薄血膜；一种将血液涂成圆盘状，叫厚血膜。最好一张玻片上制作厚、薄两种血膜。,四血膜的制作（薄血膜的制作）,薄血膜 用推片一端边缘的中点从取血部分取约11.5微升的血量（相当于1/4火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，并形成25350夹角，待血液向两侧扩展约 2cm2.5cm宽时，均匀而迅速地从右向左推成舌状薄血膜（约2.5cm长）。推制时速度要均匀，血滴大小、推片与载玻片之间夹角大小及展开血膜的速度快慢等常影响血膜的厚薄。制成的薄血膜应在玻片上形成平铺的血细胞，细胞之间互相接触而不相互重叠。薄血膜外观：舌状厚薄均匀

12、，无划痕，位于玻片1/21/3处。,四血膜的制作（厚血膜的制作）,厚血膜 用推片的左下角，从取血部位刮取约45微升血量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转24圈，涂成直径0.81cm大小圆形厚血膜(厚血膜的厚度以一个油镜视野内可见到510个白细胞为宜)，厚血膜的位置，位于玻片右1/3处。厚血膜外观：圆形厚薄均匀，无划痕。过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。,四血膜的制作（厚薄血膜的制作）,四血膜的制作（血膜的位置）,涂制厚、薄血膜的位置 通常将厚、薄血膜涂在一张载玻片上。方法是将载片分为6等分，第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3格中央，薄血膜涂在

13、第4格前缘至第6格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个；门诊和发热病人血片每片1人，涂2个厚血膜1个薄血膜，以防血膜脱落而影响检查；,四各种不同的疟疾血片涂制法,标准血片（1人）,门诊发热病人血片（1人）,居民普查血片（2人）,四标准的疟疾厚薄血膜位置,四血膜的制作（编号）,血膜制成后，立即在玻片面上写上受检者的号码，以防差错；待薄血膜干后再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号和受检者的个人编号，依次顺序插入标本盒内。,四血膜的制作（注意事项）,清洗玻片，且勿碰撞、磨损。刚涂制的血膜要平放，注意防尘、防昆虫吸吮血膜。厚血膜未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不

14、易溶血和着色而影响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜；干后应及时装入标本盒并盖严。血膜应自然干燥。切忌在毒太阳下晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽可能24-48h内固定染色；冬天也不能超过72h。放置时间越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定（1-3分钟）然后用过滤清水对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以后染色。,五染色（染液的种类）,目前临床上应用最广泛的是瑞氏和吉氏染液，这些染液中包含美兰、伊红和美兰氧化所成的天青，所以称多色性染剂。我们主要用吉氏染液，它具有方便、染色效果稳定，便于长期保存的优点。瑞氏染液染

15、色时间短，但染色效果不如吉氏稳定，主要在门诊量大的门诊实验室使用。,五染色（染色原理）,红细胞和疟原虫的蛋白质均由氨基酸组成，每个氨基酸电离出一个带正电荷的-NH3+和一个带负电荷的-COOH-。碱性染料美兰的有色基团带阳离子，可与细胞中带负电荷的COOH-部分结合，使之成为蓝色。疟原虫的酸性蛋白质被染成蓝色。酸性染料伊红的有色基团带阴离子，可与细胞中带正电荷的NH3+部分结合，使之呈红色；美兰和伊红都不能使疟原虫的核着色，但美兰氧化后产生的天青有媒染作用。在媒染物与染料的共同作用下，疟原虫的核被染成紫红色。,五染色（染色原理）,注意：蛋白质和氨基酸都是两性电解质，要求染液的PH值6.8-7.

16、2做好。染液偏酸时，所带的正电荷增加，易于伊红结合，使红细胞和疟原虫的核染成鲜红色，而淋巴细胞和原虫的着色较差。反之，当染液偏碱时，红细胞和嗜伊红白细胞等颗粒被染成紫蓝色，不易观察。,五染色（吉氏染液的染色方法）,先用甲醇或无水酒精固定薄血膜,再用清水对厚血膜溶脱血红蛋白，然后再进行染色。注意：吸取母液时，不要晃动瓶子,以免沉淀物泛起影响染色效果.成批血片染色：将已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入3%吉氏染液稀释液（3毫升吉氏原液加缓冲液或净水97毫升，混匀）浸没血片，同时对厚薄血膜染色30min（根据当地实际情况，酌情增减染色时间和浓度），然后用清水轻轻将染液漂洗干净，将血片标本（血膜

17、面朝下）插于晾干板上晾干，包装，镜检。单张血片染色：将处理好的血膜，加姬氏母液1-2滴，加中性蒸馏水15-30滴，染色30分钟左右，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。较理想的染色结果是红细胞为淡红或淡紫红色，疟原虫的胞质呈蓝色，核为紫红色，疟色素为棕褐色。,五染色（吉氏染液浓度）,门诊染色,操作1（快染）配制5%染液，（每张血片约需染液2ml）：量筒内量2ml缓冲液或新鲜凉开水，直接滴加吉氏原液7滴，混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，染色10min，清水细缓冲洗，晾干镜检。操作2(慢染)配制3%染液：在染色量筒内量2ml蒸馏水或新鲜凉开水，再滴加吉氏原液4滴，混匀，滴入待染标本上，染

18、色3040min。清水细缓冲洗，晾干镜检。,五染色（影响染色效果的因素）,血片的染色好坏除与玻片清洁度，血片的制作质量和染色技术等有关外，还受到以下因素影响：染料和溶剂的质量;染料、甲醇和甘油必须用分析纯，且在配置时所用的器具必须干净且无水份。染液的新旧：染液存放的时间越久，染色力越强。新配置的染液因色素尚未充分分解，染色力较弱且常呈现偏碱性，通常在染液配置1-2周后才使用，盛装染液的瓶子应加塞盖密，以防吸潮而影响染液质量。染液稀释后的使用时间：必须现用现稀释染液，当时使用，一般在0.5小时内染色最强。吉氏和瑞氏染液的主要成分是美兰、伊红和由美兰氧化产生的天青，三者能在酒精溶液中溶解，但在水溶

19、液中伊红遇到美兰和天青即产生沉淀。,五染色（影响染色效果的因素）,染液的稀释浓度：染液的浓度高，着色就快而深，从而使疟原虫寄生的红细胞薛氏点粗大显著，但颜色常偏碱；染液浓度过低则染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不明显或消失。染色时间：染色时间根据染液质量、新旧、浓度和气温而适当增减。染色时间长，效果好，反之较差。室温高，着色快，染色时间可略缩短，气温低可适当延长。染色用水：染液的稀释用水和染色后冲洗用水应选择PH6.8-7.2的清洁用水，通常用新鲜的蒸馏水和过滤的冷开水。冲洗方法：应沿玻片或染色缸边缘加水使染液表面一层溢出，并轻轻冲洗以免染液色素颗粒玷污血膜。,六血片制作与染色注意事项,使用前载玻

20、片一定要清洁，不然会影响血片制作和镜检结果。厚血膜干燥时不要加热，加热会使原虫变形，影响镜检结果。配置母液时过滤可除去杂质颗粒，有助于提高镜检质量。固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜 冲洗染液时，不要冲走厚血膜。,七血片镜检,在学习镜检疟原虫之前，必须对正常厚薄血膜中各种血细胞的形态、内部结构和染色性质加以区别。镜检疟原虫，首先学看薄血膜，在基本掌握薄血膜中疟原虫基本形态后，再学习镜检厚血膜。镜检疟原虫一般只检查厚血膜，薄血膜仅作为原虫分类时参考和血片编号之用。镜检疟原虫须用油镜头配合5低倍目镜镜检，档发现疑难问题时再调换10 目镜进行观察。检查时应从厚血膜的上缘开始，使血膜从上而下，自左至右

21、，一行接一行，一个视野稍叠一个视野顺序地查完整个血膜。一般情况下。厚血膜四周（稍薄些）疟原虫数量较多，且形态较清楚，镜检时不要忽略。每张厚血膜检查时间最好不少于20分钟。,七血片镜检,七血片镜检,看完血片后，若为阳性，应立即按血片标号登记原虫的种、期，以防差错。为检查后记录结果方便起见，对疟原虫的种、期可使用英文字母缩写作为代号：间日疟：P.V恶性疟：P.F卵形疟：P.O三日疟：P.M环状体:R大滋养体:T裂殖体:S配子体:G,八原虫密度计算,估计疟原虫感染程度有三种方法半定量计算法 检查厚血膜白细胞原虫密度计算法 检查厚血膜红细胞感染率计算法 检查薄血膜,八原虫密度计算（半定量计算法）,用厚

22、血膜每个视野中观察到疟原虫的平均数粗略地估计出疟原虫密度。国内常用，此方法将密度分为6及：全厚血膜查见疟原虫数在10个以内，记录实际数字。全厚血膜查见疟原虫数在10个以上，但平均每个视野不到1个虫，记录少。平均每个视野1-5个虫，记录“+”。平均每个视野6-10个虫，记录“+”。平均每个视野11-100个虫，记录“+”。平均每个视野100个以上虫，记录“+”。,八原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）,用于疟疾研究。用于临床诊断。用于抗疟后疟疾考核。,八原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）,在厚血膜中，按要求选择视野，计算每个视野中的疟原虫数和白细胞数，一般情况下计算200个白细胞，如果原虫

23、密度较低，可增加白细胞计数（500-1000个）。白细胞疟原虫计算公式：疟原虫数白细胞数每微升血中白细胞数=疟原虫数/微升血制作厚血膜的同时计算每微升血中白细胞数，如果无法进行白细胞计数，则以6000个/每微升计算。（国际标准8000个）,八原虫密度计算（白细胞疟原虫密度计算法）,假设200个WBC中有35个疟原虫，在不知患者WBC的情况下，以每微升血6000个计算，由此计算疟原虫的密度为：352006000=1050/ul,九如何确定疟原虫血片为阴性,检查全部厚血膜未查见疟原虫。最少检查100个油镜视野未查见疟原虫。镜检时间不少于20分钟。,十人体疟原虫的基本结构,疟原虫的基本构造为细胞质（

24、胞浆）、核和疟色素三部分。细胞浆：被染成蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细胞浆逐渐增多。核：即细胞质或染色质粒，在正常情况下核呈鲜红色。疟色素：不着色，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫的色素颗粒呈细砂状，呈黑褐色。,十一、薄血膜中常见的血液成分,中性白细胞,酸性粒细胞,血小板,大单核细胞,淋巴细胞,十二、薄血膜中被疟原虫寄生 红血球形态特征,间日疟原虫被寄生红细胞胀大色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多,恶性疟原虫被寄生红细胞大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，数少,十三、薄血膜疟原虫形态,间日疟 环状体红血球：正常。大小：较大，约为红 细胞直

25、径1/3。胞浆：环状，浅蓝色。核：红色，一个，偶有 二个。色素：没有。,十三、薄血膜间日疟环状体,十三、薄血膜间日疟环状体,十三、薄血膜疟原虫形态,恶性疟环状体红血球：大小正常,颜色较深。大小：较小，约为红细胞 直径1/51/6。胞浆：兰色，环状纤细，有时位于红细胞的边缘。常见多个同寄生一红细胞现象。核：红色一个,常有二个。色素：没有。,十三、薄血膜疟原虫形态,恶性疟环状体,十三、恶性疟薄血膜环状体,十三、恶性疟薄血膜环状体,十三、恶性疟薄血膜环状体,十四、薄血膜中小滋养体形态特征,恶性疟原虫小滋养体约为红细胞的 1/6；环纤细；核12个；一个红细胞寄生2个环状体的常见,间日疟原虫小滋养体约为

26、红细胞直径的13；环较粗大；核1个；2个核和一个红细胞寄生2个环状体，不如恶性疟原虫多见,十五、薄血膜疟原虫形态,间日疟大滋养体红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等，分布均匀，数 目较多，鲜红色薛氏小 点。大小：较大。胞浆：不规则，浅兰色，出现阿米巴伪足，有空泡。核：红色，一个。疟色素：有，细小杆状，黄褐色，分布不均匀。,十五、薄血膜疟原虫形态,间日疟大滋养体,十五、薄血膜疟原虫形态,十五、薄血膜间日疟滋养体,十五、薄血膜间日疟滋养体,十五、薄血膜疟原虫形态,恶性疟大滋养体红细胞：大小正常，颜色较深，可出现较粗、大小不一、分布不匀、数目较少红色茂氏小点。大小：较小。胞浆：兰色，圆形，坚实，体积小

27、。核：一个，红色。色素：较细的黑褐色颗粒，常集成块。,十六、薄血膜中大滋养体形态特征,间日疟原虫大滋养体虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色素细小，黄褐色,恶性疟原虫大滋养体体小，圆形；空泡小；早期疟色素细小，金黄色，晚期结成块状，黑褐色,十七、薄血膜疟原虫形态,间日疟未成熟裂殖体红细胞：胀大，褪色，可有薛氏小点。胞浆：较不规则，空泡小或消失，浅兰色。核：红色，分裂为二个以上。色素：黄褐色，分布不均匀。,十七、薄血膜疟原虫形态,间 日 疟 未 成 熟 裂 殖 体,十七、薄血膜疟原虫形态,十七、薄血膜疟原虫形态,恶性疟未成熟裂殖体红细胞：大小正常，颜色较深，可 有茂氏小点。大小：较小。胞浆：

28、规则，圆形或卵圆形，兰 色。核：分裂为二个以上，红色。色素：黄褐色颗粒，常集成黑褐 色团块。,十八、薄血膜中裂殖体前期形态特征,间日疟原虫裂殖体前期圆形或不规则；核分裂为2个以上，空泡消失；疟色素分布不匀,恶性疟原虫裂殖体前期圆形，核分裂为2个以上；疟色素集成团快,十九、薄血膜疟原虫形态,间日疟成熟裂殖体红细胞：胀大，褪色，可见薛氏 小点。大小：个体较大。胞浆和核：裂殖子1224个平均 16个，排列不规则，核红色，胞浆浅兰色。色素：黄褐色常集于疟原虫的一 边。,十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体,十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体,十九、薄血膜间日疟成熟裂殖体,十九、薄血膜疟原虫形态,恶性疟成熟裂殖体红细

29、胞：大小正常，颜色较深，可见茂氏小点。大小：虫体较小。胞浆和核：裂殖子836个平 均1824个，排列 不规则或呈二重排列，核红色胞浆兰色。色素：黑褐色，集中于中央 或一侧。,二十、薄血膜中成熟裂殖体形态特征,间日疟原虫裂殖体大于正常红细胞；裂殖子1224个，通常16个，排列不规则；疟色素常集于一侧，黄褐色,恶性疟原虫裂殖体小于正常红细胞；裂殖子较小，826个，排列不规则；疟色素成团快状，黑褐色,二十一、薄血膜疟原虫形态,间日疟大（雌）配子体形状大小：圆或椭圆，较大。胞浆：深兰色。核：一个，较小，深红色常偏于一边，核周可见明显不染色带。色素：黄褐色，均匀散在，数目较多。,二十一、薄血膜疟原虫形态

30、,间日疟小（雄）配子体 形状大小：圆形，虫体较大。胞浆：浅兰色。核：一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，周围有明显不着色 带。色素：黄褐色，散在分布。,二十一、薄血膜配子体,二十一、薄血膜配子体,二十一、薄血膜疟原虫形态,恶性疟大（雌）配子体形状大小：新月形，两端稍尖。胞浆：深兰色。核：一个，较小，致密，深红色位于中央，核周可见透明不染 色带。色素：黑褐色，密布于核 的周围,二十一、薄血膜疟原虫形态,恶性疟小（雄）配子体形状大小：腊肠形，两端钝圆。胞浆：浅兰色或淡紫红色。核：一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，核周可见不染色带。色素：黑褐色，疏松地分 布于核周围。,二十一、恶性疟配子体,二十一

31、、恶性疟配子体,二十一、恶性疟配子体,二十二、薄血膜中大（雌）配子体形态特征,间日疟原虫雌配子体小于正常红细胞，圆形；核小，致密，深红色，偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在,恶性疟原虫雌配子体新月型，两端较尖；核小，致密，深红色，位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周,二十三、薄血膜中小（雌）配子体形态特征,间日疟原虫雄配子体大于正常红细胞，圆形；核大，疏松，浅红色，多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在,恶性疟原虫雄配子体腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，位于中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周,二十四、大配子体与大滋养体区别,虫体大小:几乎充满被寄生的红细胞核:一个，较大且致密，

32、周围有一圈空白的不染色带胞浆:边缘清楚，不含空泡疟色素:颗粒较多较粗，均匀散在,虫体大小:不超过被寄生红细胞的3/4核:一个，延长呈带状，周围无明显的不染色带浆:边缘不整齐，多有空泡疟色素:颗粒较少较细，分布不均匀,二十五、厚血膜中疟原虫的形态,厚血膜由于用血量较多，涂制的血膜小，红细胞重叠且干燥慢，致使虫体皱缩，空泡消失，胞浆变形，其形态改变的程度与疟原虫运动的强弱、空泡有无和大小有关。各期疟原虫在发育中，大小滋养体明显的阿米巴样运动，其他期仅有轻微运动；大、小滋养体含明显空泡，裂殖前期的空泡不明显或消失，成熟裂殖体和配子体均无空泡。,二十五、厚血膜中疟原虫的形态,在厚血膜中，各期疟原虫的体

33、积都略为缩小，其中只有大、小滋养体的形态有较大改变，而裂殖体和配子体的形态则无明显变化。,二十六、厚血膜小滋养体 形态,小滋养体 胞浆呈环状或向核的一侧或两侧收缩，使环的中间断裂，或围绕核。间日疟原虫的环较大，常呈分号“；”和感叹号“！”状；而恶性疟原虫的环纤细，常呈分号“：”、飞鸟“.”、V状和断环状。,二十六、厚血膜恶性疟小滋养体,恶性疟环状体在发育不同阶段，其个体大小有很大变化。注意粗环与间日疟环状体的区别。,二十七、厚血膜间日疟大滋养体 形态,大滋养体,间日疟大滋养体呈阿米巴样运动，胞浆常断裂几块或缩成圆形，核和疟色素均被包在胞浆之中，着色深，只隐约可见红色的核和黄绿色的疟色素。胞浆可

34、皱缩断裂成几个块状，大小不一，似互不连接。核位于胞浆之中或外边。疟色素分布不均匀。有些仅见胞浆和疟色素而核看不清楚。,二十八、厚血膜恶性疟大滋养体形态,大滋养体,恶性疟原虫大滋养体，与薄血膜形态相似，常呈圆形，体小结实，疟色素细小，金黄色，结成块状后，呈黑褐色。,二十九、厚血膜裂殖体 形态,裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前期及成熟殖体，除虫体略为缩小着色较深外，均与薄血膜相似。,间日疟裂殖体,恶性疟裂殖体,三十、厚血膜间日疟配子体 形态,小配子体,大配子体,间日疟原虫的配子体呈圆形或卵圆形，除虫体略缩小且着色深外，均与薄血膜相似。间日疟雄配子体，核大，疏松，圆形或呈星状，胞浆较少，着色

35、淡，疟色素颗粒大，数量较多，散在分布。雌配子体与圆形成熟的大滋养体相似，但配子体疟色素颗粒粗大，多而散在分布。,三十一、厚血膜恶性疟配子体 形态,小配子体,大配子体,恶性疟原虫的配子体呈新月形或腊肠形，如血膜干燥较慢，则可缩成圆形，核居中，疟色素围在核周，外围一圈胞浆。此外，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和疟色素，或核和胞浆均消失，只留下一些疟色素。,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,间日疟环状体,三十二、厚

36、血膜间日疟原虫形态,图注：本片上、下、左、右各有一个疟原虫。上、右、左均为大小不同的环状体；下为大滋养体，虫体已断裂成数块，但可见有薛氏点的红细胞残骸间日疟,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,本片中部有两个白细胞，在其左上方、左下方各有一个大滋养体；其右上方有两个大滋养体，胞浆皆已绉缩成数块，但皆有红细胞残骸可见间日疟,三十二、厚血膜间日疟原虫形态,虫体位于本片中部，胞浆皱缩为多块，色素聚集于虫体右上方；本虫上方为一个大滋养体,滋养体,裂殖体,三十二、厚血膜恶性疟环状体,7个环状体散在于5个白细胞之间，每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂的或皱缩的原浆,恶性疟,三十二、厚血膜恶性疟配子体,三十三、厚血膜恶性疟配子体,人体四种疟原虫红内期各期形态鉴别,环状体,大滋养体,未成熟裂殖体,成熟裂殖体,雄配子体,雌配子体,