新生儿疾病筛查技术..ppt

《新生儿疾病筛查技术..ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《新生儿疾病筛查技术..ppt（65页珍藏版）》请在课桌文档上搜索。

1、新生儿疾病筛查技术进展,新生儿疾病筛查中心,新生儿疾病筛查的意义 新生儿疾病筛查是指医疗保健机构在新生儿群体中，用快速简便敏感的检验方法，对一些危及儿童生命、危害儿童生长发育、导致儿童智能障碍的先天性疾病遗传代谢性疾病进行群体筛查，从而使患者在临床上未出现疾病表现，而其体内生化、激素水平已有明显变化时就做出早期诊断，及时有效地进行治疗，从而保证儿童正常的智能发育和体格发育,新生儿疾病筛查中心,筛查疾病的选择标准：疾病危害严重，可导致残疾或致死。疾病早期无特殊症状，但有实验室指标 显示阳性。有可靠的、适合大规模进行的筛查方法 筛查的疾病可以治疗。特别是通过早期 治疗能逆转或减慢疾病发展 筛查费用

2、低廉，成本效益较好,新生儿疾病筛查中心,新生儿疾病筛查的历史：新生儿疾病筛查概念的形成 细菌抑制法的建立 CH筛查方法的建立 脐带血测定TSH 新生儿末梢血T4测定 干血滤纸片测定TSH,新生儿疾病筛查中心,“新生儿疾病筛查”概念的形成：1934年挪威生化学家Folling首次报道PKU。1953年德国Bickel医生使用饮食疗法治疗PKU获得成功，并同时提出早诊断、早治疗的想法，设想尽早将患儿从正常人群中筛选出来。“新生儿疾病筛查”概念由此形成。,新生儿疾病筛查中心,新生儿疾病筛查在国外的研究情况 目前世界上已经有很多国家开展了新筛工作。对新筛的研究十分活跃，从1966年首届新生儿疾病筛查的

3、国际会议在南斯拉夫召开，到现在已经召开了10余届。1993年在日本召开了第一届亚太地区新筛会议，今年 9月在上海将召开第五届亚太地区新筛会议。,新生儿疾病筛查中心,新生儿疾病筛查的进展 筛 筛 查 查 疾 技 病 术 增 改 加 进,新生儿疾病筛查中心,筛查的疾病 1982年，在日本东京召开的第二届国际新生儿疾病筛查大会上提出了适合大规模筛查的四种疾病：PKU、CH、Gal、CAH。随着对遗传代谢病的深入了解和新的筛查技术的应用，又有一些疾病被列入筛查范围，如葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症、生物素酶缺乏（BDD）、酪氨酸血症、镰状红细胞贫血（SCD）、His、MSUD、HC、囊性纤维化（

4、CF）等疾病。应用串联质谱可筛查包括氨基酸代谢异常、有机酸代谢异常和脂肪酸代谢异常约30种疾病。,新生儿疾病筛查中心,筛查方法的改进：半定量 分析、定量分析 放免方法、酶免疫方法、荧光免疫方法、时间分辨荧光免疫分析法、串联质谱技术、基因芯片技术等。筛查技术的重大突破是从“一种实验检测一种疾病”发展到“一种实验检测多种疾病”。,新生儿疾病筛查中心,新生儿疾病筛查的现状 目前，全世界每年有数千万新生儿进行筛查，一些国家已经将新生儿疾病筛查列入国家卫生法，或者采用行政手段，使活产新生儿的筛查覆盖率接近100%。美国每年有400万婴儿接受新生儿疾病筛查。,新生儿疾病筛查中心,世界部分国家开展的新生儿筛

5、查项目 国家 PKU CH Gal CHA CF BDD MSUD SCD HS 其他 U S A 日 本 新西兰 意大利 巴 西 阿根廷 奥地利 德 国 比利时 英 国 法 国 丹 麦 瑞 士,新生儿疾病筛查中心,部分亚洲国家开展的新筛项目国家或地区 筛查疾病 开始时间 中 国 PKU、CH、G6PD#、CAH#1981 中国台湾 PKU、CH、CAH、Gal、G6PD、HC、（MS/MS）1981 中国香港 CH、G6PD 1984 日 本 PKU、CH、CAH、Gal、MSUD、HC、（MS/MS）70年代初 韩 国 PKU、CH、MSUD、Gal、His、HC、（MS/MS）1991

6、菲 律 宾 CH、PKU、CAH、G6PD 1996 泰 国 CH、PKU 1996 新 加 坡 CH、G6PD 1965 越 南 CH 1998 蒙 古 CH 2000,新生儿疾病筛查中心,中国新生儿疾病筛查的状况 我国的新生儿疾病筛查开始于80年代，1994年颁布的中华人民共和国母婴保健法第24条明确提出要“逐步开展新生儿疾病筛查、婴儿多发病和常见病防治等医疗保健服务”，将新生儿疾病筛查第一次写入母婴保健法。新生儿疾病筛查这项工作得到了政府的重视，2001年6月20日国务院公布了中华人民共和国母婴保健法实施办法，新生儿疾病筛查的推广和提高是其中的重要内容。,新生儿疾病筛查中心,截止到199

7、8年，我国已经在16个省建立了18个新生儿疾病筛查中心。大多数筛查中心筛查的疾病是PKU和CH，无锡、上海和南京增加了先天性肾上腺皮质增生的筛查。其中上海筛查了50600个新生儿，筛出3例21羟化酶缺乏的患者，发病率为1：16866。广东、广西增加了葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的筛查。G6PD是一种红细胞酶的缺陷病，在广东、广西、云南、四川发病率较高，据统计广州的发病率是3.6%，湛江地区发病率为4.6%。,新生儿疾病筛查中心,为保证新筛工作能够高质量顺利的完成，以下三个方面是必不可少的：1。强大健全的筛查网络 2。严格准确的筛查实验 3。及时追踪、治疗、随访患者,新生儿疾病筛查中心,

8、强大健全的筛查网络 新生儿疾病筛查属于预防医学的范畴旨在早期确认患某种特定遗传代谢性疾病的患儿，它是遗传学实验渗入到预防医学的 标志。新生儿疾病筛查必须在各级卫生行政部门的支持领导下纳入预防医学发展规划中，制定相关的政策、法规，建立良好的筛查管理网络，强化机构、人员许可制度，才能保证标本及时地采集、递送、随访，并建立有效的监督评价机制。利用各种卫生宣传活动，孕妇学校，张贴宣传新筛意义的相关资料，对孕妇、新生儿的父母、医护人员进行宣传教育，使之认识到新生儿疾病筛查的重要性和必要性。,新生儿疾病筛查中心,严格准确的筛查实验 新生儿疾病筛查实验绝非仅指新筛实验室具体的标本测定过程，而是一个包括多个环

9、节的全过程。新筛是在患者未出现症状之前，通过实验检查把患者筛选出来。因此，对疾病诊断的唯一依据就是实验结果，这与通常进行的临床检验项目意义显然不同。筛查结果显示阳性，就能把患儿筛选出来，如果实验结果是假阴性，就会出现漏诊。,新生儿疾病筛查中心,新生儿筛查的技术路线 标本的采集 标本的运输 标本登记编号 标本的分析 结果分析,治疗 随访,新生儿疾病筛查中心,标本的采集1.手套和采血针的选择:手套无滑石粉、每一个新生儿更换一个。采血针要能够控制穿刺深度，3mm2.采血人员的要求：经过正规培训考核合格的固定人员，严格掌握采血时间、足跟部位、方法、合格血片的标准、正确填写采血卡片的内容，并要执行签名制

10、度。采血的质量直接影响到筛查实验的正确性。3.采血卡片的填写：4.采血登记：,新生儿疾病筛查中心,5.采集时间：对于苯丙酮尿症，在无蛋白质负荷或少蛋白质负荷时，血中苯丙氨酸含量较低，实验结果可能出现假阴性。生后72小时采血，既可以保证新生儿吃足母乳，又可以避过TSH生理性高峰期。6.标本保存和递送：标本叠放时应将血斑交替隔开放置，避免两张卡片的血斑相互污染，冰箱放置，7天左右送到新筛中心。,新生儿疾病筛查中心,实验室分析新生儿疾病筛查常用技术和方法 苯丙酮尿症筛查方法 细菌抑制法 酶法 荧光分析法,新生儿疾病筛查中心,细菌抑制法（bacterial inhibition assay BIA)1

11、961美国Guthrie医生建立了细菌抑制法，是苯丙氨酸半定量测定法，具有灵敏、简便、重复性好、经济、不需要特殊设备，适合于大规模群体筛查等优点。19621963年，用此方法在美国进行了40万新生儿筛查，发现患者20多人，并进行了早期治疗。,新生儿疾病筛查中心,实验原理 枯草杆菌变异菌株(bacillus subtilis AATT6633)的生长需要苯丙氨酸存在。若在培养基中加入苯丙氨酸的抑制剂-2噻吩丙氨酸后，细菌的生长受到抑制，-2噻吩丙氨酸对枯草杆菌的生长抑制作用可因外界加入苯丙氨酸得到解除。所以在含有适当比例枯草杆菌和-2噻吩丙氨酸的培养平板上，将含有新生儿血滴的干血滤纸片放入培养板

12、上，标本上的苯丙氨酸渗入周围培养基中，经过37孵育过夜，如果苯丙氨酸存在过量，,新生儿疾病筛查中心,由于其竞争抑制使细菌恢复了生长。细菌环直径的大小与苯丙氨酸的浓度成正比。根据生长环直径的大小与已知量的标准菌环直径比较，即可得出样品中苯丙氨酸的含量。仪器和材料 仪器：3mm直径打孔器、37恒温培养箱、超净工作台等,新生儿疾病筛查中心,材料：枯草杆菌ATCC 6633芽孢悬液、0.5mmol/L-2噻吩丙氨酸、苯丙氨酸标准滤纸片、10 x Demains 营养液、青霉素酶,新生儿疾病筛查中心,操作步骤培养板的制备：1.5g琼脂加135ml蒸馏水，加热溶解，自然冷却至6065 后加入：10 x D

13、emains 营养液 15ml 抑制剂 1.5ml 枯草杆菌 0.25ml 青霉素酶 0.15ml 充分混匀到入培养板，备用。,新生儿疾病筛查中心,加样：用3mm直径的打孔器打下标准血片、质控血片和待测血标本，用镊子将血片放在相应的编号上。孵育和观察：将培养板放入37恒温培养箱过夜，次日取出，量取标准和待测血标本细菌生 长环直径，通过标准曲线的回归方程，计 算标本中苯丙氨酸的含量。,新生儿疾病筛查中心,结果判断：凡血苯丙氨酸浓度切值的标本，均先进行原标本复查，再招回新生儿进一步取样复查，进行苯丙氨酸定量分析，以便确诊。,新生儿疾病筛查中心,荧光测定法 荧光法是定量测定苯丙氨酸的一种方法。该方法

14、灵敏度高，商品化试剂盒的检测低限为0.5mg/dl。当血胆红素200mol/L时，对实验结果无干扰。通过严格控制pH值可最大程度控制其他氨基酸的干扰。,新生儿疾病筛查中心,实验原理 苯丙氨酸与茚三酮反应，形成荧光化合物，在反应体系中加入二肽L-亮氨酸-L-丙氨酸可提高荧光反应，用琥珀酸盐缓冲液严格控制反应条件，pH值在5.80.1可保证理想的荧光值和最大的特异性。加入铜试剂稳定荧光复合物并终止反应。,新生儿疾病筛查中心,仪器和材料仪器：荧光读数仪 自动洗扳机 振荡仪 3 mm打孔器 加样器,新生儿疾病筛查中心,材料：商品化试剂盒，包括茚三酮、L-亮氨酸-L-丙氨酸、琥珀 酸盐缓冲液、铜试剂、标

15、准 品、质控品、酶标板等。,新生儿疾病筛查中心,操作步骤1.用3mm打孔器分别将标准品、质控品、待测血标本打下，依次放入酶标板内。2.每孔加入80l的80%乙醇，室温振荡30分钟，900转/分。3.转移50 l洗脱液至另一块酶标板。4.加50 l反应混合液，振荡1分钟后，37温育2小时。,新生儿疾病筛查中心,5.每孔加200 l冷的铜试剂，冷却反应混合物至室温。6.室温放置15分钟。7.加入铜试剂后1530分钟内，在波长485nm处，测定每孔的荧光强度。结果判断 可用电脑酶标工作软件，自动绘制标准曲线，计算标本的苯丙氨酸浓度。,新生儿疾病筛查中心,干血滤纸片促甲状腺激素的 测定方法 酶免疫分析

16、法 荧光酶免疫分析法 时间分辨荧光免疫分析法,新生儿疾病筛查中心,酶免疫分析法 又称为酶联免疫吸附分析法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。酶免技术是以酶标记抗体或抗原作为主要试剂，与标本中待测的相应抗原或抗体反应后，通过标记物的放大作用，检测出标本中的待测物质。该方法的特点是具有高度的特异性和敏感性。新生儿甲低的筛查使用的是双抗体夹心法测定干血滤纸片中的抗原hTSH浓度。,新生儿疾病筛查中心,原理 利用固相反应板包被抗hTSH抗体，成为固相抗体反应板，加入直径3mm的被测定的干血滤纸片、标准干血滤纸片、质控干血滤纸片和酶标记抗体液（辣根过氧化物

17、酶，hTSH-HRP),通过一定时间的反应，由于两种单克隆抗体所抗hTSH相位上的不同，在反应体系中，从干血滤纸片、标准干血滤纸片、质控干血滤纸片中溶出的 hTSH都能与固相抗体和酶标记抗体同时结合，形成双抗体夹心抗原hTSH的复合物。待反应稳,新生儿疾病筛查中心,定后，滤纸片和血液中的其他成分以及游离的过量酶标记抗体经洗涤而被去除，此时反应体系中被测物质的含量与酶成一定的比例关系，然后加入酶作用的底物，经酶对底物一定时间的催化作用，使底物变成可测定的产物，最后通过酶标仪读出产物的吸收值。此读数的高低与被测物TSH的含量成正比。通过与在同等条件下测得的标准值比较由绘制的标准曲线计算出未知标本中

18、hTSH的含量。,新生儿疾病筛查中心,试剂和材料1.试剂盒的组成：包被抗hTSH抗体的96孔固相反应板、酶标记的抗hTSH抗体复合物、酶反应底物（四甲基联苯胺TMB）、显色剂稀释液、标准干血滤纸片1套、终止液等。2.仪器：酶标读数仪（配备电脑）、振荡仪、洗扳机、打孔器、自动多道可调移液器等。,新生儿疾病筛查中心,操作步骤1.试剂的准备：试剂盒从冰箱那出后恢复至室温再用。部分试剂使用前现用现配，试剂打开后要在有效期内使用。2.将未知样品编好号后，和标准品、质控样品一起，用3mm打孔器打下来，加入96孔包被板。标准品和质控品为重复双管。3.加洗脱液，振荡孵育，4静置过夜。4.弃去反应液、纸片、洗涤

19、。5.加入酶标记的抗体，振荡孵育。,新生儿疾病筛查中心,6.加入显色剂，避光反应30分钟。7.加终止液，酶标计数仪450nm处读取吸光值。结果计算和判断 以标准系列的吸光值为纵坐标（Y轴），hTSH浓度为横坐标（X轴）绘制标准曲线坐标图。未知样品浓度可通过电脑自动计算出来。如果干血滤纸片TSH浓度大于切值，需要对原干血滤纸片标本复查。复查TSH值仍大于切值的，应招回新生儿，采取静脉血测定T3、T4、TSH、FT3、FT4，进一步确诊该新生儿是否患有先天性甲状腺功能低,新生儿疾病筛查中心,时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）也称为“解离扩增镧系荧光免疫分析法（DELFIA）。是20世纪80年代问

20、世的一种非放射性免疫分析方法。主要特点是以稀土元素作为示踪剂标记抗原或抗体，这些稀土元素如铕（Eu3+)、钐（Sm3+)等，与待测物反应形成的螯合物经紫外线激发不仅荧光强度高，且衰变时间长。Eu3+和Sm3+的荧光衰变分别为430微秒和41微秒，而样品中蛋白质的自然本底荧光为110微秒,相差,。,4倍以上。利用这一差别，待短半衰期的自然本底荧光衰变后再测定，所测信号完全为稀土螯合物的荧光，从而消除了非特异干扰的影响。测定灵敏度可达10-17mol/L。实验原理 DELFIA测定干血滤纸片中的TSH，采用“固相双位点、双抗体夹心法”。96孔板上包被有抗人TSH抗体，干血滤纸片、标准品和质控品中皆

21、含有TSH抗原，该抗原决定簇,新生儿疾病筛查中心,上有、两个位点。固相hTSH抗体与位点结合，而带有铕标记的抗TSH抗体与、两个位点都有部分结合，经过孵育反应后，在管壁上形成一个“hTSH抗体+hTSH+Eu标记hTSH抗体”的复合物。由于Eu的量与血片中TSH抗原含量一致，因此将反应体系中未结合的Eu标记物洗净，再加入增强液把Eu解离下来，与扩增液内成分形成高荧光强度的螯合物。测定螯合物的荧光值，即可得到TSH含量。,新生儿疾病筛查中心,仪器和材料：仪器:Wallac1235自动时间分辨荧光免 疫分析仪等材料：除试剂盒外，其余同酶免方法操作步骤：打好血片后，上机。,新生儿疾病筛查中心,结果计

22、算和判断 DELFIA荧光测定仪内配有专用计算软件（Multicala),可自动处理绘制标准曲线，直接打印出每秒钟的荧光脉冲数和TSH浓度。荧光脉冲数与TSH浓度成正比关系，形成的标准曲线是直线。筛查切值：10IU/ml,新生儿疾病筛查中心,新生儿疾病的发展趋势-MS/MS 在串联质谱应用前，新生儿疾病筛查主要采用细菌抑制法、放免法、酶免法等等。这些均是一种实验检验一种疾病的方法。随着筛查疾病种类的增加，临床对遗传代谢病诊断和鉴别诊断的要求也在增加。另外，上述实验方法的工作量较大，这些都不能满足新生儿疾病筛查发展的需要。,新生儿疾病筛查中心,20世纪60年代质谱技术（MS）有了很大发展，能对未

23、知化合物的结构进行分析。气相色谱质谱联用仪（GC/MS）的出现对许多有机酸代谢紊乱的诊断和某些脂肪酸氧化缺陷病的诊断起了重要作用。串联质谱（MS/MS）技术的出现，使分析的灵敏度和信噪比大大提高，可分析痕量化合物，并且避免了GC/MS、LC/MS中来自柱流失、热解、吸附、记忆效应、化学反应等噪音。,新生儿疾病筛查中心,串联质谱的研究和发展，使其有可能成为遗传代谢病的常规诊断工具。它可以在2分钟内对一个新生儿的干血滤纸片同时进行近30种遗传代谢性疾病的检测，即多种氨基酸代谢异常、有机酸代谢异常、脂肪酸代谢异常。实现了one test-one disease to one test-many di

24、sease的转变。串联质谱方法还显著降低了假阳性率。,新生儿疾病筛查中心,20世纪90年代串联质谱就已经应用于新生儿疾病的筛查，最近几年在一些发达国家和地区已经作为常规的筛查方法。随着医学技术的发展，致病基因的不断发现和定位以及对遗传代谢病认识的深入，不断地有新的疾病加入串联质谱的筛查项目中，尤其是线粒体脂肪酸氧化缺陷病的筛查逐渐得到重视。据估计在婴儿猝死中大约有36%是因为脂肪酸氧化缺陷引起的，这类疾病现在可以通过串联质谱分析得到诊断。因此，有人将其称之为“代谢解剖”,新生儿疾病筛查中心,串联质谱分析的基本原理 质谱主要是将被测物质分子电离成质荷比不同的带电粒子，然后应用电磁学原理，使这些带

25、电粒子按照质荷比大小在空间和时间上产生分离并排列成图谱，通过测定离子峰的强度，可获得化合物的相对分子量。质谱峰的强度与其代表的化合物的量成正比，利用这一点可进行定量分析。串联质谱是将两个质谱仪用一个碰撞室串联而成，第一个质谱仪作为混合物样品的分离器，第二个质谱仪作为组分的鉴定器。当在直接进样,新生儿疾病筛查中心,系统中导入一个混合物样品，经离子源电离，调节第一个质谱仪的磁场，经过质量分析器的分离，混合物中的离子按质量数的不同而分开，然后选择需要分析鉴定的离子进入碰撞室，经碰撞活化后进一步裂解产生的子离子进入第二个质谱仪，第二个质谱仪作为鉴定器，经过不同的扫描记录即可得到串联质谱的图谱。,新生儿

26、疾病筛查中心,串联质谱的样品制备和分析样品制备：串联质谱分析的样品采用新生儿出生72小时的干血滤纸片。用甲醇提取，加入内标，使得定量分析更准确。随着各种软离子技术尤其是电喷雾电离技术的应用，降低了样品准备的要求，使样品处理自动化，适应了新生儿疾病筛查高通量的要求。,新生儿疾病筛查中心,串联质谱分析 串联质谱的操作方式 1.子离子扫描：即子找母的方式，主要用于化学结构的分析。2.母离子扫描：适用于检测同一类化合物，它们破碎后形成相同的亚结构碎片。如在脂肪酸氧化缺陷病中肉碱类化合物的分析中主要采用母离子扫描。3.中性丢失扫描：两个质谱仪在同样速度下进行扫描，但两者相差一定质量数,新生儿疾病筛查中心

27、,测得的质谱将揭示丢失了一个选择质量后的所有离子。氨基酸的测定一般采用中性丢失扫描。由此可以看出，如果同时进行氨基酸和肉碱的分析，单一的扫描方式已不适应。较理想的分析方式是多反应分析与单扫描功能相结合的多频道分析摸式。最后使用计算机辅助的自动化分析系统来变换不同的设置模式处理复杂的数据，使得串联质谱能够在2分钟内精确地分析不同的化合物组成。,新生儿疾病筛查中心,串联质谱结果分析 遗传代谢病是由于人体内某些酶生物合成发生障碍，引起体内毒性中间代谢产物积累或必需代谢物的缺乏，在血液中表现为相应代谢物如氨基酸、乙酰肉碱的含量增高。串联质谱是通过计算离子率，即代谢物的丰度与相应内标丰度之比，然后在预先

28、建立的标准曲线上将比率转换成浓度，以诊断相应的遗传代谢缺陷病。,新生儿疾病筛查中心,串联质谱筛查的氨基酸代谢病（16种）苯丙酮尿症（PKU）枫糖尿症（MSUD）同型胱氨酸尿症（homocystinuria)酪氨酸血症I型、II型，暂时性酪氨酸血症 组氨酸血症 高甲硫氨酸血症 非酮性高血糖症 高脯氨酸血症I型、II型 高鸟氨酸血症 瓜氨酸血症 精氨琥珀酸尿症 精氨酸酶缺乏 磷酸氨甲酰合成酶缺乏,新生儿疾病筛查中心,串联质谱筛查的有机酸代谢紊乱病（13种）丙酸血症 异戊酸血症 戊二酸血症I型、II型 甲基丙二酸血症 甲基丙二酸辅酶-A变异酶缺乏症,新生儿疾病筛查中心,串联质谱筛查的脂肪酸氧化缺陷病

29、（10种）短链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症 中链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症 长链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症 极长链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症 长链羟化乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症 肉碱棕榈油酰合成酶缺乏症 肉碱棕榈油酰转移酶缺乏症 肉碱转运体缺乏症 2,4二烯酰辅酶A还原酶缺乏症 肉碱/乙酰肉碱转位酶缺乏症,新生儿疾病筛查中心,简要介绍几种用串联质谱筛查的代谢病：1.酪氨酸血症：分为I、II、III型 酪氨酸血症I型:是由于延胡索酰乙酰乙酸水解酶（FAH）缺陷，使得具有高度毒性的中间产物积聚在肝脏和肾脏。FAH基因位于人类染色体15q23-q25,有14个外显子，20多种突变。临床症状最早在生后2个月即可出现，血浆酪

30、氨酸浓度中度升高，血清和尿中出现琥珀酰乙酰乙酸和琥珀酰丙酮。急性发病者多数在一岁内死于肝功能衰竭。,新生儿疾病筛查中心,酪氨酸血症II型 是由酪氨酸氨基转移酶缺陷引起。人类酪氨酸氨基转移酶基因编码454个氨基酸。基因位于16q22，至今已报道10多种酪氨酸氨基转移酶的突变。酪氨酸血症II型患者血浆酪氨酸浓度严重升高，伴有酪氨酸尿症，生后数月可出现角膜病变，约一半的患儿有轻至中度的智力低下。,新生儿疾病筛查中心,酪氨酸血症III型 由4-羟基苯丙酮酸二氧化酶缺陷引起。4-羟基苯丙酮酸二氧化酶基因长30kb，定位于12号染色体，有14个外显子。患儿于生后1-17个月起病，有发育迟缓、间歇性共济失调

31、以及自我伤害。血浆酪氨酸浓度中度升高，血清和尿中存在4-羟基苯丙酮酸极其代谢产物。,新生儿疾病筛查中心,2.枫糖尿症（MSUD）：是由于支链氨基酸的衍生物酮酸脱羧受阻，造成支链氨基酸和支链酮酸积聚在体内，对脑组织产生神经毒性作用，导致进行性神经退化病变。枫糖尿症是常染色体隐性遗传病，发病率因种族和地区而不同。血浆中亮氨酸、异亮氨酸、颉氨酸异常增高。在新筛中规定生后24小时血亮氨酸浓度4mg/dl,就要招回。,新生儿疾病筛查中心,3.中链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症 中链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症是最常见的脂肪酸氧化缺陷病。该病的发病率与苯丙酮尿症接近。中链乙酰辅酶A脱氢酶基因位于染色体1p31，编码的蛋白是一种四聚体的黄素蛋白，能催化中链脂肪酸氧化反应的第一步。在脂肪酸氧化速度快、能量需要多的器官如肝脏、心脏等，该基因表达量较高。中链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏症虽然与基因突变有关，,新生儿疾病筛查中心,但其发病与否受到环境因素影响，长时间饥饿状态是最常见的诱因。出生5个月后，多数婴儿夜间呈空腹状态，需要分解脂肪维持血糖浓度，此时容易诱发此病。当机体需要高能量代谢时，也会诱发此病。约24%的患者第一次发病即导致死亡，有些患者终生可无任何临床表现。,